[發明專利]一種用于乳腺癌腫瘤標志物檢測的試劑盒及方法

有效

• 申請號: 202010552691.1
• 申請日: 2020-06-17
• 公開（公告）號: CN113009138B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 韓琳;王春華;張宇;劉宏
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/574;B01L3/00
• 代理公司: 青島華慧澤專利代理事務所(普通合伙) 37247
• 代理人: 劉娜

本發明公開了一種用于乳腺癌腫瘤標志物檢測的試劑盒及方法，包括微流控芯片、純化的重組蛋白CA153、CA125、CEA、AFP和CA199，生物素標記的CA153單克隆檢測抗體、CA125單克隆檢測抗體、CEA單克隆檢測抗體、AFP單克隆檢測抗體和CA199單克隆檢測抗體；APC?霉鏈親和素偶聯物、封閉液、工作液和抗體稀釋液；所述微流控芯片包括反應層襯底和位于其上的微流道加樣層，所述反應層襯底包括載玻片基板和組裝于載玻片基板上的氧化石墨烯量子點納米材料基底，所述氧化石墨烯量子點納米材料基底上印刷有CA153、CA125、CEA、AFP和CA199單克隆捕獲抗體條形碼。本發明所公開的試劑盒及方法可以實現快速、準確、高通量和相對廉價地檢測乳腺癌腫瘤標志物。

技術領域

本發明涉及腫瘤標志物檢測領域，特別涉及一種用于乳腺癌腫瘤標志物檢測的試劑盒及方法。

背景技術

乳腺癌是成年女性常見的惡性腫瘤，也是成年女性癌癥死亡的主要原因一。乳腺癌在全球女性惡性腫瘤中新發病率占第一位，死亡率占第二位。每年約有7.9萬新病例，占全部女性惡性腫瘤總數21％。全世界乳腺癌年均發病率為30.30/10萬，世界人口調整率(世調率)為32.97/10萬。

乳腺癌早期發現及時治療是保證良好預后的關鍵，因為，在乳腺癌死亡病例中，90％合并遠處轉移。目前，對于乳腺癌的篩查手段主要以患者自查、醫生觸診(clinicalbreastexamination，CBE)及超聲篩查(ultrasonography，US)和乳腺鉬靶X線檢查(mammography，MAM)，前兩者均屬于觸診，一般在腫瘤大于2cm后才有可能被發現，而US也僅能發現0.5cm以上的腫塊，MAM對年輕女性更不占有優勢。因此，臨床收治的乳腺癌患者全部是影像學能夠發現的，約有1/3的患者已發生了淋巴結遠處轉移，2/3的患者屬于局部晚期或晚期。

隨著乳腺癌的治療方法和臨床藥物的進步，乳腺癌患者的生存率得到了有效的提高，5年生存率達到90％，但是，在所有女性惡性腫瘤死亡率仍居第二位。因此，如何安全而有效地發現早期患者，進行早期非手術治療，提高治愈率及患者生活質量，是目前國內外關注的熱點。

對乳腺癌的早期篩查是提高患者生存率的關鍵。腫瘤標志物CEA、CA125、CA199、CA153和AFP是乳腺癌重要的標志物，它們與乳腺癌的診斷和預后有重要的關系。它們是乳腺癌的相關抗原，存在于乳腺癌細胞中，并能釋放入血，檢測血中CEA、CA125、CA199、CA153和AFP水平可用于檢測乳腺癌。血液或者組織中腫瘤標志物的檢測為癌癥患者的早期診斷、臨床監測、疾病治療和康復監測提供了重要信息。由于各種疾病控制的需求不斷增加，靈敏、低成本、即時檢測方法已經極大地吸引了相關研究者的興趣。

傳統的腫瘤標志物檢測方法主要有酶聯免疫分析，放射免疫測定法、化學發光分析、質譜分析等。但是，這些方法并不能滿足即時檢測的要求。傳統的檢測方法——ELISA試劑盒，通過逐個檢測，消耗大量的樣品來完成多種生物標志物的檢測。電化學方法具有較高的靈敏度，但其高通量檢測能力有限。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了一種用于乳腺癌腫瘤標志物檢測的試劑盒及方法，以達到可以匹配自動分析系統實現快速、準確、高通量和相對廉價地用于大規模臨床檢驗乳腺癌腫瘤標志物的目的。

為達到上述目的，本發明的技術方案如下：

一種用于乳腺癌腫瘤標志物檢測的試劑盒，包括微流控芯片、純化的重組蛋白CA153、CA125、CEA、AFP和CA199，生物素標記的CA153單克隆檢測抗體、CA125單克隆檢測抗體、CEA單克隆檢測抗體、AFP單克隆檢測抗體和CA199單克隆檢測抗體；APC-霉鏈親和素偶聯物、封閉液、工作液和抗體稀釋液；