[發明專利]一種致病菌檢測反應器及其制備和應用方法

有效

• 申請號: 202010528203.3
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111690510B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 周麟;葛玉卿;毛紅菊;趙建龍;楊宏波;張欣
• 申請（專利權）人: 上海前瞻創新研究院有限公司;中國科學院上海微系統與信息技術研究所
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/34;C12Q1/686
• 代理公司: 北京英特普羅知識產權代理有限公司 11015
• 代理人: 林彥之

本發明公開了一種致病菌檢測反應器及其制備和應用方法，涉及致病菌檢測技術領域，包括：由兩層薄膜密封形成豎向排列的裂解區、混合區、以及反應區；所述裂解區一側與所述混合區之間通過封裝隔離帶分隔，另一側設有進樣口；所述反應緩沖區分別于所述混合區和所述反應區相通；所述反應區包括至少一個用于預埋內參靶標的第一反應區和至少一個用于預埋測試靶標的第二反應區；所述第一反應和第二反應結均具有包括至少一個反應池的反應件；解決現有技術中病原體檢測微流控芯片結構復雜，操作繁瑣和成本較高的問題。

技術領域

本發明涉及致病菌檢測技術領域，尤其涉及一種致病菌檢測反應器及其制備和檢測方法。

背景技術

據世界衛生組織報道,全球每年發生腹瀉病的病例高達1.5億,其中70％病例與各種致病性微生物污染食品有關，據最新資料顯示,微生物是食源性疾病主要病原，大約占將近一半，因此，致病菌快速檢測已經直接關系到國家安全、社會經濟發展與社會民生。

基于核酸擴增的方法是現有的一種有效而準確的病原體鑒定方法，但是該方法需要繁瑣的操作(包括裂解、核酸提取、擴增，甚至測序)，微流控芯片技術是將生物、化學、醫學分析過程的樣品制備、反應、分離、檢測等基本操作單元集成到一塊微米尺度的芯片上，自動完成分析全過程的技術，將這些步驟都集成在同一微流控芯片中，是目前傳染性致病菌防護、衛生防疫檢驗、食品安全現場快速檢測的迫切需求。

但是為了滿足上述步驟的集成以及密封性和生物兼容性的需求，現有的病原體檢測微流控芯片大多結構比較復雜，尤其不適用于致病菌免提取純化試劑體系的檢測應用，操作繁瑣且成本較高。

發明內容

本發明的目的是提供一種致病菌檢測反應器及其制備和檢測方法，用于解決現有技術中病原體檢測微流控芯片結構復雜，尤其不適用于致病菌免提取純化試劑體系的檢測應用，因此操作繁瑣和成本較高的問題。

為實現上述目的，本發明提供一種致病菌檢測反應器，包括：由兩層薄膜密封形成依次豎向排列且連通的裂解區、混合區、以及反應區；

所述裂解區一側與所述混合區之間通過封裝隔離帶分隔，另一側設有進樣口；

所述反應區包括至少一個用于預埋內參靶標的第一反應區和至少一個用于預埋測試靶標的第二反應區；

所述第一反應和第二反應均具有包括至少一個反應池的反應件。

進一步的，反應區和混合區之間設有至少一個反應緩沖區，所述反應緩沖區所述反應區和所述混合區連通的管道上均設有控制閥。

進一步的，所述第一反應區和第二反應區分別通過獨立的反應緩沖區與所述混合區連通。

進一步的，所述封裝隔離帶為熱壓細窄條紋，用于從所述裂解區或所述混合區被擠壓后形成至少一個混合通道。

進一步的，所述薄膜為透明柔性高分子材料，所述高分子材料為聚碳酸酯、聚丙烯、聚對苯二甲酸乙二酯或熱塑性彈性體材料中的一種。

進一步的，所述用于預埋測試靶標的第二反應區設置兩個，且所述第一反應區與各個所述第二反應區并列設置。

進一步的，所述反應區還具有多個冗余液體區；各個所述冗余液體區分別與第一反應區和第二反應區連接；

所述冗余液體區一端與所述反應腔靠近所述反應緩沖區一側連通。

進一步的，所述反應件包括帶有至少一個通孔的結構板；

以及設置在結構板一側的封閉薄膜層和設置在另一側的帶小孔的薄膜層；

所述通孔與兩側薄膜層形成反應池。

進一步的，所述反應池中預埋有PCR反應的引物、DNTP以及反應所需的酶。