[發明專利]一種人工淚液及其制備方法在審
| 申請號： | 202010526901.X | 申請日： | 2020-06-11 |
| 公開（公告）號： | CN111588736A | 公開（公告）日： | 2020-08-28 |
| 發明（設計）人： | 王曉冰;徐欣 | 申請（專利權）人： | 溫州醫科大學附屬第一醫院 |
| 主分類號： | A61K35/28 | 分類號： | A61K35/28;A61K38/47;A61K9/08;A61K47/36;A61P27/04;A61P27/02;A61P37/02;C12N5/0775;A61K31/722;A61K33/14 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 謝秀娟 |
| 地址： | 325000 浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 人工 淚液 及其 制備 方法 | ||
1.一種人工淚液，其特征在于，包含0.0005-0.005wt％的人臍帶間充質干細胞外泌體。
2.根據權利要求1所述的人工淚液，其特征在于，所述人工淚液還包括1-4wt％的溶菌酶、0.01-1wt％的黃原膠、0.1-4wt％的水溶性羥丙基殼聚糖及電解質。
3.根據權利要求2所述的人工淚液，其特征在于，所述電解質包括氯化鈉、氯化鉀和/或氯化鈣。
4.根據權利要求3所述的人工淚液，其特征在于，所述氯化鈉的量為所述人工淚液的0.8-1wt％，所述氯化鉀的量為所述人工淚液的0.01-0.02wt％，所述氯化鈣的量為所述人工淚液的0.035-0.055wt％。
5.根據權利要求1所述的人工淚液，其特征在于，所述人臍帶間充質干細胞外泌體的制備方法，包括以下步驟：
(1)培養足量的人臍帶間充質干細胞，在提取干細胞外泌體前48h，PBS清洗細胞，更換無血清培養基，繼續培養48h；
(2)收集無血清培養基，300×g離心10min，取上清；
(3)2000×g離心10min，取上清；
(4)10000×g離心30min，取上清；
(5)100000×g離心70min，取沉淀；
(6)PBS重懸沉淀，100000×g離心70min，收集沉淀,即得所述人臍帶間充質干細胞外泌體。
6.根據權利要求5所述的人工淚液，其特征在于，所述步驟(1)具體為：
在普通血清培養基上培養足夠量的人臍帶間充質干細胞，培養的溫度為36～38℃，培養時環境CO2的體積濃度為4％～6％；在提取干細胞外泌體前48h，用PBS清洗細胞，更換無血清培養基，繼續培養48h。
7.一種權利要求1-6任一項所述的人工淚液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將黃原膠和水溶性羥丙基殼聚糖置于注射用水中充分浸泡溶脹，直至完全溶解；
(2)將電解質直接溶解于注射用水中；
(3)將溶菌酶直接溶解于注射用水中；
(4)將以上步驟所制備的液體混合后充分攪拌均勻得復合液體；
(5)將人臍帶間充質干細胞外泌體加入到所述復合液體中；
(6)將復合液體加注射用水至足量，充分攪拌均勻后再用磷酸鈉鹽緩沖劑調節PH至6-7，得到人工淚液中間品；
(7)將所得的人工淚液中間品經抽濾，精濾，通過無菌灌裝得成品。
8.一種權利要求1-6任一項所述的人工淚液在制備治療或預防眼部不適癥狀的藥物中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述眼部不適癥狀包括干眼癥引起的眼部不適癥狀和自身免疫性葡萄膜炎、結膜炎、角膜炎和角膜潰瘍引起的眼部不適癥狀。
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