[發明專利]一種遺傳性耳聾基因突變的試劑盒

在審

• 申請號: 202010525518.2
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN113774117A
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 梅艷巧;謝桂貞;陳培華;郭岳
• 申請（專利權）人: 上海浦東解碼生命科學研究院
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 上海愉騰專利代理事務所(普通合伙) 31306
• 代理人: 唐海波

本發明公開了一種遺傳性耳聾基因突變的試劑盒，屬于生物技術領域，該試劑盒用于檢測遺傳性耳聾基因12S rRNA、GJB2和GJB3的20位點及SLC26A4基因全外顯子是否發生突變，其引物序列如SEQ ID No.1～46。本發明提供的遺傳性耳聾基因突變的試劑盒用于遺傳性耳聾的早期發現、診斷和早期干預康復，可廣泛應用于產前診斷，降低遺傳性耳聾的發病率，能夠檢測雜合突變與純合突變，從而降低漏診雜合突變攜帶者的概率，并且，其準確性更高。

技術領域

本發明涉及一種試劑盒，尤其涉及檢測遺傳性耳聾基因12S rRNA、GJB2和GJB3共3基因20位點及SLC26A4基因全外顯子是否發生突變，具體涉及一種遺傳性耳聾基因突變的試劑盒。

背景技術

耳聾是最常見的感覺障礙性疾病之一，可引起聾啞殘疾。盡管此類疾病一般不危及生命，但是會給個人生活、家庭和社會帶來沉重的負擔。2006年的殘疾人抽樣調查顯示，我國的聽力殘疾人約2004萬，占殘疾人總數的24.16％，占全國人口的1.53％。聽力言語殘疾者中7歲以下的聾兒達80萬人并以每年新增3萬聾兒的速度在增長。在每年出生的新生兒中，重度聽力障礙者約占1-3‰，一名聾啞兒童的手術及康復最低以30萬元計算，僅僅使7歲以下的80萬聾兒回到有聲世界，則至少也要花費2400億元，造成了巨大的財政支出和社會家庭負擔。耳聾中遺傳因素占比例約為60％，另外在大量的遲發性聽力下降患者中，亦有許多患者由于自身的基因缺陷致病，或由于基因缺陷和多態性造成對致聾環境因素易感性增加而致病，所以耳聾的基因檢測對耳聾的診斷和預防至關重要。

基因診斷又稱DNA診斷或分子診斷，通過分子生物學和分子遺傳學的技術，直接檢測出分子結構水平和表達水平是否異常，從而發現遺傳性疾病的基因改變，對疾病做出判斷。遺傳性耳聾的基因診斷可以用于(1)各種不明原因的耳聾病因診斷，包括先天耳聾和后天耳聾；(2)家族中有遺傳性或不明原因耳聾的聽力正常人群，檢測是否為突變基因攜帶者；(3)已生育一耳聾后代，生育第二個后代的產前診斷；(4)需要使用氨基糖苷類抗生素前的診斷，防止“一針致聾”。

針對中國人群中常見的耳聾相關基因進行檢測，包括：

(1)線粒體12S rRNA：線粒體位于細胞質中，其突變所致耳聾的傳遞方式呈母系遺傳，家族中的母系成員均攜帶致病基因。部分線粒體突變者對氨基糖苷類藥物有易感性，使用正常劑量或微量的藥物就可以造成聽力損失，即“一針致聾”。通過篩查攜帶線粒體突變的患者，對其未發病的母系親屬進行用藥指導，能預防藥物性耳聾發生。該檢測還可應用于孕期母親及新生兒篩查、氨基糖甙類藥物應用前的預防性檢查等。

(2)GJB2：間隙連接蛋白β2(gap junction protein,GJB2)基因為最常見的耳聾相關基因。GJB2基因的產物可以自身或與其家族成員以六聚體的形式在細胞與細胞間形成間隙連接，使相鄰細胞間能夠進行小分子與代謝物的交換。GJB2基因突變導致耳蝸功能障礙，臨床表型復雜，從輕度直至深度耳聾都可能與GJB2基因突變相關。GJB2基因突變約占中國先天性耳聾病因的30％。因其為常染色體隱形遺傳，且受計劃生育的影響，大多數家族只出現單個病人。對GJB2基因進行診斷，不但可以明確部分先天性耳聾的遺傳學病因，指導產前診斷，還能預測電子耳蝸移植效果。

(3)GJB3：間隙連接蛋白β3(gap junction protein,GJB3)基因是連接蛋白家族中的一個成員，GBJ3基因突變不僅可以引起顯性或隱性形式遺傳的感音神經性耳聾，而且還與皮膚疾病以及外周神經病有關。

(4)SLC26A4基因：SLC26A4基因突變會導致大前庭水管綜合征，在耳聾人群中的突變頻率位居第二位，僅次于GJB2基因。SLC26A4基因突變可以導致前庭導水管擴大，包括單純性前庭導水管擴大或者是合并耳蝸畸形的前庭導水管擴大。臨床上主要表現為高頻聽力損失為主的感音神經性耳聾，聽力損失程度多表現為重度或者是極重度聾。