[發明專利]一種地特胰島素的制備方法

在審

• 申請號: 202010523777.1
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN113773395A
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 唐亞連;劉慧玲;楊接運
• 申請（專利權）人: 寧波鯤鵬生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/62;C12N15/70;C12P21/06;C07K1/06;C07K1/20;A61K38/28;A61P3/10
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

1.一種制備地特胰島素的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(A)利用重組菌進行發酵，制備地特胰島素前體融合蛋白，

(B)利用所述的地特胰島素前體融合蛋白，制備地特胰島素，

其中，所述的地特胰島素前體融合蛋白從N端到C端具有式III所示的結構：

A-FP-TEV-R-G (III)

式中，

“-”代表肽鍵；

A為無或前導肽，

FP為綠色熒光蛋白折疊單元，

TEV為第一酶切位點，較佳地為TEV酶酶切位點；

R為用于酶切的精氨酸或賴氨酸；

G為地特胰島素主鏈或其活性片段；

其中，所述的綠色熒光蛋白折疊單元包含2-6個選自下組的β-折疊單元：

β-折疊單元	氨基酸序列
u1	VPILVELDGDVNG(SEQ ID NO:11)
u2	HKFSVRGEGEGDAT(SEQ ID NO:12)
u3	KLTLKFICTT(SEQ ID NO:13)
u4	YVQERTISFKD(SEQ ID NO:14)
u5	TYKTRAEVKFEGD(SEQ ID NO:15)
u6	TLVNRIELKGIDF(SEQ ID NO:16)
u7	HNVYITADKQ(SEQ ID NO:17)
u8	GIKANFKIRHNVED(SEQ ID NO:18)
u9	VQLADHYQQNTPIG(SEQ ID NO:19)
u10	HYLSTQSVLSKD(SEQ ID NO:20)
u11	HMVLLEFVTAAGI(SEQ ID NO:21)。