[發明專利]一種基于疏水修飾明膠微球的脂肪酶界面固定化的方法

有效

• 申請號: 202010523718.4
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111808839B
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 阮奇珺;付強;李圣男;林晨;王李平
• 申請（專利權）人: 廣東省測試分析研究所（中國廣州分析測試中心）
• 主分類號: C12N11/04
• 分類號: C12N11/04;C12N9/20;C08B37/08
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 蔣歡妹;莫瑤江

1.一種基于疏水修飾明膠微球的脂肪酶界面固定化的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒：將交聯殼聚糖納米顆粒加入脂肪醛濃度為5-15wt.%脂肪醛溶液中，以正己烷為溶劑，磁力攪拌下反應，反應結束后離心、清洗得脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒；其中交聯殼聚糖納米顆粒的制備方法包括以下步驟：殼聚糖粉末溶解在乙酸水溶液中，攪拌使其完全水合，調節pH值到4-7，然后用分散機和高壓微射流納米均質機分散均質，添加0.001-1 wt.%京尼平在35-45℃下共價交聯24-48h，再經高壓微射流均質得到均勻的交聯殼聚糖納米膠分散體，然后160℃噴霧干燥獲得；脂肪醛選自正庚醛、正壬醛或十一醛中任一種；

2）脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球的制備及其相應Pickering乳液的制備：步驟1）制備的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒、司盤80超聲分散于礦物油中獲得均勻分散的懸濁油相；5-10wt%的脂肪酶溶液離心去除雜質，取上清液溶解10-20wt.%的B型明膠，并調節pH為6.5，作為水相；將油相置于30-40℃水浴中，攪拌下往油相中逐滴加入水相，繼續乳化20-30min，獲得醛改性交聯殼聚糖納米顆粒穩定的W/O型Pickering乳液，冷卻至室溫，按體積比1：2在得到的W/O型Pickering乳液中加入正己烷，震蕩破乳，析出油相，獲得下層的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球；以獲得的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球為粒子乳化劑，制備穩定的Pickering乳液，油相為正己烷，水相為含脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球的去離子水，油水比例為3：1。

2.權利要求1所述的基于疏水修飾明膠微球的脂肪酶界面固定化的方法獲得的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球的應用，其特征在于，用于酶促反應。

3.根據權利要求2所述的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球的應用，其特征在于，包括以下步驟：以獲得的脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球為粒子乳化劑，制備穩定的Pickering乳液，油相為正己烷，在正己烷的油相中添加底物己酸和己醇，水相為含脂肪醛疏水改性交聯殼聚糖納米顆粒修飾明膠微球的去離子水，在離心管中按油水比例3：1震蕩乳化制備Pickering乳液，進行酶促反應；己酸和己醇都為0.2-0.8mol/L。