[發明專利]一種含人端粒酶逆轉錄酶納米透皮脂質體的制備方法及應用

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• 申請號: 202010519004.6
• 申請日: 2020-06-09
• 公開（公告）號: CN111514039A
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 南程成
• 申請（專利權）人: 上海姿妙健康管理咨詢有限公司
• 主分類號: A61K8/14
• 分類號: A61K8/14;A61K8/66;A61K8/55;A61K8/63;A61K8/86;A61Q19/08
• 代理公司: 深圳市創富知識產權代理有限公司 44367
• 代理人: 吳族平

本發明公開一種含人端粒酶逆轉錄酶納米透皮脂質體的制備方法，所述方法包括以下步驟：使用乙醇溶液將卵磷脂、膽固醇、PEG?2000在磁力攪拌的條件下混勻，獲得混合液一；配置hTERT水溶液，在磁力攪拌的條件下混勻，獲得混合液二；將所述混合液一與混合液二混合獲得混合液三；將所述混合液三使用磁力攪拌器攪拌后進行超聲處理；將經過超聲后的混合液三繼續使用磁力攪拌器攪拌；將獲得的脂質體用無菌濾器進行過濾；將過濾后的溶液存于無菌離心管中。本發明有益效果在于，該納米透皮脂質體具有良好的透皮性和生物活性，能夠用作化妝品中面膜、爽膚水、凍干粉等的添加劑，具有良好的面部細胞抗衰老作用；同時該脂質體功效溫和，不會給面部細胞增加額外的負擔。

技術領域

本發明屬于醫學美容領域，具體涉及一種含人端粒酶逆轉錄酶納米透皮脂質體的制備方法及應用。

背景技術

衰老是生物體發育成熟后，隨著年齡的增加，機體組織器官的機能逐漸減退，最終趨向死亡的過程。面部皮膚衰老是人體衰老的直觀表現，皮膚的衰老主要表現為皮膚松弛、出現皺紋、色素斑點沉著、色澤暗淡等。衰老一直是生命科學關注的重點領域。細胞發生衰老的機制包括復制性衰老、DNA損傷誘導性衰老、原癌基因誘導衰老等。其中細胞連續復制導致的衰老是最常見的。

在正常的人體細胞分裂過程中，隨著細胞分裂次數的增加，細胞的端粒會不斷縮短，最終導致細胞的衰老和死亡。端粒位于染色體的末端，能夠保護亞端粒區遺傳信息的穩定。作為一種生物衰老相關的重要標志物，端粒在細胞復制性衰老的病理生理過程中起著決定性作用。如果染色體中的端粒在細胞復制過程中不變短，細胞就不會衰老。

端粒酶的相對分子質量為200-500KD,是細胞中負責延長端粒的一種核糖核蛋白復合體，其活性與人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)的表達密切相關。研究表明外源性hTERT可以提高細胞端粒酶的活性，賦予細胞延緩衰老或永生化能力。

發明內容

人端粒酶逆轉錄酶要到達面部皮膚的真皮層細胞內發揮作用，需要通過致密的角質層和細胞膜結構。同時人端粒酶逆轉錄酶本質上屬于蛋白質，對于環境中的光、溫度、Ph變化非常敏感，也容易造成端粒酶的失活。基于以上缺點，我們構建了一種磷脂雙分子層的類似細胞膜結構的納米脂質體。通過該納米脂質體包裹人端粒酶逆轉錄酶，不僅能夠實現長時間保持端粒酶的活性，也能夠使包裹的端粒酶順利到達真皮層的細胞內發揮作用。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種含人端粒酶逆轉錄酶納米透皮脂質體的制備方法，所述方法包括以下步驟：

S1使用乙醇溶液將卵磷脂、膽固醇、PEG-2000在磁力攪拌的條件下混勻，獲得混合液一；

S2配置0.1-0.5mM的hTERT水溶液，在磁力攪拌的條件下混勻，獲得混合液二；

S3將所述混合液一緩慢滴入所述混合液二中,獲得混合液三；

S4將所述混合液三使用磁力攪拌器攪拌2h；

S5將經過S4攪拌的混合液三放入超聲波儀器中，超聲45min；

S6將經過S5超聲后的混合液三繼續使用磁力攪拌器攪拌10h，獲得脂質體；

S7將S6獲得的脂質體用無菌濾器進行過濾；

S8將S7過濾后的溶液存于無菌離心管中，并放于4℃環境中保存，即獲得含人端粒酶逆轉錄酶納米透皮脂質體。

優選的，所述卵磷脂、所述膽固醇、所述PEG-2000的摩爾比為15：23：6。

優選的，所述步驟S1、步驟S4、步驟S6的磁力攪拌器的攪拌速度為1000-3000轉/分。