[發(fā)明專利]用于預(yù)測(cè)肝癌是否復(fù)發(fā)的生物標(biāo)志物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010514464.X
• 申請(qǐng)日: 2020-06-08
• 公開（公告）號(hào): CN111748624B
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高潔;郭丹風(fēng);杜瀟瀟;史曉奕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;G01N33/68;G01N30/88
• 代理公司: 鄭州豫開專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41131
• 代理人: 朱俊峰

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)分子診斷領(lǐng)域，具體涉及一種蛋白分子作為肝癌生物標(biāo)志物及其預(yù)后方法；用于預(yù)測(cè)肝癌復(fù)發(fā)的生物標(biāo)志物，包括LAS1L蛋白，CLTB蛋白，JAGN1蛋白，ALYREF蛋白和HNRNPA3蛋白中的一種或幾種蛋白分子。本發(fā)明采用LC?MS/MS質(zhì)譜分析法，將大量臨床樣本進(jìn)行質(zhì)譜分析后，在蛋白質(zhì)檢測(cè)中篩選出來(lái)5個(gè)有代表性的蛋白分子。通過(guò)肝癌未復(fù)發(fā)患者癌組織與肝癌復(fù)發(fā)患者癌組織相應(yīng)分子含量的差異倍數(shù)（大于2或小于0.5）最終確定5個(gè)蛋白分子具有良好的檢驗(yàn)效益；將LAS1L蛋白，CLTB蛋白，JAGN1蛋白，ALYREF蛋白和HNRNPA3蛋白作為生物標(biāo)志物對(duì)被試者進(jìn)行肝癌預(yù)后診斷，簡(jiǎn)單易行、診斷過(guò)程安全有效、易為病人所接受、診斷標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一且受主觀因素影響較小。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)分子診斷領(lǐng)域，具體涉及一種用于預(yù)測(cè)肝癌是否復(fù)發(fā)的生物標(biāo)志物。

背景技術(shù)

肝癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居世界第6位，死亡率居第三位，每年約有25萬(wàn)人死于肝癌。肝癌由于起病隱匿，惡性程度高，治愈率低，是嚴(yán)重威脅人類健康和生活質(zhì)量的惡性腫瘤之一，且肝癌的發(fā)病率每年都在持續(xù)地上升。中國(guó)是全世界肝癌每年新增病例最多的國(guó)家,占全世界總發(fā)病率的一半,且歐美國(guó)家發(fā)病率雖不高但也在逐年增加。肝細(xì)胞性肝癌（HCC）是肝癌最主要的組織學(xué)類型，占原發(fā)性肝惡性腫瘤的70%～85%，在我國(guó)更是占到了約90%。迄今為止，HCC的發(fā)病機(jī)理仍然不明確，但病毒感染、黃曲霉素B1攝入和酗酒等被認(rèn)為是HCC主要的致病因素。其中10%～40%慢性B型肝炎病毒攜帶者最終將發(fā)展為肝細(xì)胞癌，全世界每年估計(jì)超過(guò)1百萬(wàn)患者死于B型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）和C型肝炎病毒相關(guān)的肝癌。在中國(guó)和日本，75%～80%HCC發(fā)病與肝臟慢性病毒感染關(guān)系密切，其中B型肝炎病毒感染率占50%～55%，而世界范圍內(nèi)80%～90%的HCC病例合并有肝硬化。因此，肝臟HBV感染及肝硬化是HCC最主要的高危因素和癌前病變過(guò)程。

肝癌的目前治療手段主要有介入栓塞，手術(shù)切除，射頻消融，生物靶向治療等，但是即便如此，肝癌的預(yù)后仍舊較差。究其原因，肝癌術(shù)后的復(fù)發(fā)占有相當(dāng)大的比例。因此，肝癌術(shù)后定期隨訪監(jiān)測(cè)患者腫瘤相關(guān)指標(biāo)，早期發(fā)現(xiàn)和診斷肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，是肝癌預(yù)后研究的重要課題。臨床上常用的腫瘤標(biāo)記物甲胎蛋白（ＡＦＰ）敏感性低，部分肝癌術(shù)后患者腫瘤復(fù)發(fā)未能及時(shí)檢出。肝臟穿刺病理活檢用于肝癌診斷及其復(fù)發(fā)診斷最為可靠，但對(duì)患者的損傷較大。影像學(xué)手段被廣泛應(yīng)用于術(shù)后隨訪中，根據(jù)與甲胎蛋白的結(jié)合能夠更好地發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的腫瘤。上述方法雖都有一定的優(yōu)勢(shì)，但是都需要患者定期復(fù)查，這對(duì)于很多依從性較差的患者來(lái)說(shuō)很難實(shí)現(xiàn)。

肝癌復(fù)發(fā)的來(lái)源一是多中心發(fā)生，即肝癌根治性切除后，由于肝癌生長(zhǎng)的土壤（肝硬化）和其它促癌因素的繼續(xù)存在，再發(fā)新的腫瘤；二是單中心發(fā)生，即原先切除病灶術(shù)前、術(shù)中癌細(xì)胞經(jīng)門靜脈途徑播散，發(fā)生肝內(nèi)復(fù)發(fā)和肝外轉(zhuǎn)移。目前對(duì)影響肝癌術(shù)后預(yù)后因素的研究，主要集中于對(duì)腫瘤大小、數(shù)目、分化程度、脈管侵犯、甲胎蛋白水平等臨床病理因素的分析，而這些對(duì)肝癌肝切除后的復(fù)發(fā)尚不能進(jìn)行較準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)。因此，針對(duì)肝癌復(fù)發(fā)這一科學(xué)難題，如何對(duì)切除術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)進(jìn)行有效的預(yù)測(cè)，如何預(yù)防肝癌術(shù)后的腫瘤復(fù)發(fā)均對(duì)提高肝癌的療效有重大的臨床意義，探索和建立簡(jiǎn)單、快速、敏感性高和特異性強(qiáng)的分子預(yù)測(cè)指標(biāo)和新的治療靶點(diǎn)已成為提高臨床療效的迫切需要。

因此，如果在手術(shù)切除的標(biāo)本中加以分析，并且能夠準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，那么就可以讓高危復(fù)發(fā)人群加以重視，提高肝癌生存期。

發(fā)明內(nèi)容

（一）解決的技術(shù)問(wèn)題

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了用于預(yù)測(cè)肝癌是否復(fù)發(fā)的生物標(biāo)志物，采用質(zhì)譜分析的方法檢測(cè)生物標(biāo)志物的含量來(lái)判斷肝癌復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)；該方法簡(jiǎn)單，實(shí)用，且通過(guò)多種小分子的檢測(cè)可以更好地提高檢測(cè)方法的靈敏度與特異性。

（二）技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：