[發(fā)明專利]一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010501359.2 | 申請(qǐng)日： | 2020-06-04 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN111662866B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-07-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張印 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 愛(ài)存細(xì)胞生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N5/0775 | 分類號(hào)： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 廣州天河萬(wàn)研知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44418 | 代理人： | 劉強(qiáng);陳軒 |
| 地址： | 300131 天津市紅橋區(qū)咸陽(yáng)*** | 國(guó)省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 羊膜 間充質(zhì) 干細(xì)胞 培養(yǎng)基 | ||
1.一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，其特征在于，包括高級(jí)RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基，細(xì)胞生長(zhǎng)因子，Ultroser G血清替代物，L-谷氨酰胺及金銀花粉；所述高級(jí)RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基的加入量為25g/L，所述細(xì)胞生長(zhǎng)因子的加入量為2μg/L，所述Ultroser G血清替代物的加入量為50mg/L，所述L-谷氨酰胺的加入量為4μg/L，所述金銀花粉的加入量為3μg/L；所述金銀花粉的制備過(guò)程為：取干燥的金銀花，稱量1g，用研磨器磨碎，然后過(guò)300目篩，即得；所述細(xì)胞生長(zhǎng)因子由PDGF、VEGF及EGF按質(zhì)量比2：3：10組成。
2.一種如權(quán)利要求1所述的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
S1、取400mL純化水加熱至50~60℃，然后向其中加入高級(jí)RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基及L-谷氨酰胺，攪拌混合均勻，得混合物I；
S2、將步驟S1所得混合物I降溫至35~45℃，向其中加入U(xiǎn)ltroser G血清替代物及金銀花粉，混合攪拌均勻，得混合物II；
S3、將步驟S2制得的混合物II降溫至25~30℃，然后加入細(xì)胞生長(zhǎng)因子，混合均勻，加入純化水，配制成1L的培養(yǎng)基，即得。
3.如權(quán)利要求2所述的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，步驟S1所述攪拌混合均勻的條件為在150~250rpm的轉(zhuǎn)速下攪拌20~30min。
4.如權(quán)利要求2所述的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，步驟S2所述混合攪拌均勻的條件為在300~400rpm的轉(zhuǎn)速下攪拌30~40min。
5.如權(quán)利要求2所述的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，步驟S3所述混合均勻的條件為在250~350rpm的轉(zhuǎn)速下攪拌30~40min。
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