[發(fā)明專利]一種海洋節(jié)桿菌及其活性組分和篩選方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010500021.5 | 申請日: | 2020-06-04 |
| 公開(公告)號: | CN111593007B | 公開(公告)日: | 2021-10-12 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 鄭蘭紅;徐一新;王震;盛鈺婷 | 申請(專利權(quán))人: | 上海健康醫(yī)學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12P1/04;A61K35/74;A61P35/00;C12R1/06 |
| 代理公司: | 上海精晟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31253 | 代理人: | 周瓊 |
| 地址: | 201318 上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 海洋 桿菌 及其 活性 組分 篩選 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種海洋節(jié)桿菌Arthrobacter sp.MTL5?86,所述菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號為CCTCC NO:M 2019407。本發(fā)明還公開了所述菌株的抗肺癌活性組分的篩選方法和用該篩選方法篩選獲得的活性組分。本發(fā)明還公開了所述菌株的抗肺癌活性組分的制藥用途和包含該活性組分的抗肺癌藥物。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一海洋節(jié)桿菌及其活性組分和篩選方法。
背景技術(shù)
腫瘤是指在致癌基因作用下,細(xì)胞基因發(fā)生了改變,失去了對細(xì)胞正常生長的調(diào)控,導(dǎo)致單克隆性異常增生而形成的新生物。惡性腫瘤由于分化不成熟、生長較快,進(jìn)入破壞器官的結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)而發(fā)生轉(zhuǎn)移,所以對機(jī)體的影響較為嚴(yán)重。目前,癌癥在中國的發(fā)病率占到世界的22%,發(fā)病人數(shù)全球第一;由于癌癥在中國造成的死亡率占到世界的27%,位居第29位。觀察全球抗腫瘤藥物研發(fā)現(xiàn)狀,發(fā)現(xiàn)市場增速呈現(xiàn)放緩趨勢,新興國家市場中上市15 年以上的老藥仍是主力軍,新上市的藥物價格呈現(xiàn)越來越昂貴的趨勢,因此抗腫瘤藥物的研發(fā)仍具有巨大的市場潛力,應(yīng)不斷投入各方面資源,治療腫瘤疾病。
由于深海環(huán)境目前仍處于探索的高潮期,各方面新的發(fā)現(xiàn)正在不斷涌現(xiàn)。對于深海中存在的大量微生物資源,其在藥物研發(fā)方面具有巨大的潛在價值。通過提取微生物代謝產(chǎn)物,尋找蘊藏其中的抗腫瘤藥物,不斷促進(jìn)海洋活性物的開發(fā)和利用,就具有了重大的研究價值與研究意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從馬里亞納海溝海水中培養(yǎng)分離得到的能夠產(chǎn)生抗癌物質(zhì)的菌株、其抗癌活性組分及其篩選方法和用途。
本發(fā)明的第一方面是提供了一種節(jié)桿菌Arthrobacter sp.MTL5-86,所述菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號為CCTCC NO:M 2019407。
在一優(yōu)選例中,所述菌株的基因組16S rDNA堿基序列如SEQ ID No.1所示。
本發(fā)明的第二方面是提供了一種節(jié)桿菌Arthrobacter sp.MTL5-86的活性組分的篩選方法,所述方法包括如下步驟:
(1)發(fā)酵培養(yǎng)
將節(jié)桿菌Arthrobacter sp.MTL5-86菌株接種于20~40mL的培養(yǎng)基,于15~30℃、150~300 r/min的搖床里恒溫培養(yǎng)18~28h,得種子發(fā)酵液;
將種子發(fā)酵液按照4~8%的接種量接種于200~400mL的培養(yǎng)基中,于相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)30~40h,得菌種發(fā)酵液;
所述培養(yǎng)基為:蛋白胨3~7g/L,酵母粉0.8~1.2g/L,磷酸高鐵0.005~0.2g/L,以海水配制,121℃、15min滅菌。
(2)超濾分離
將菌種發(fā)酵液分批次離心,8000~10000g,8~15min,收集上清液,用分子量為0.3kDa 和30kDa的超濾膜超濾,獲得分子量為0.3~30kDa的超濾濃縮液;
(3)真空冷凍干燥
將分子量為0.3~30kDa的超濾濃縮液真空冷凍干燥,即得活性組分。
本發(fā)明的第三方面是提供了一種可用上述篩選方法篩選獲得的節(jié)桿菌Arthrobacter sp. MTL5-86的活性組分。
本發(fā)明的第四方面是提供了上述活性組分在制備預(yù)防或者治療肺癌的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了一種抗肺癌藥物,所述藥物包含上述節(jié)桿菌Arthrobactersp.MTL5-86的活性組分。
本發(fā)明各個方面的細(xì)節(jié)將在隨后的章節(jié)中得以詳盡描述。通過下文以及權(quán)利要求的描述,本發(fā)明的特點、目的和優(yōu)勢將更為明顯。
附圖說明
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