[發明專利]基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法

在審

• 申請號: 202010480429.0
• 申請日: 2020-05-30
• 公開（公告）號: CN111751347A
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 聶鵬程;瞿芳芳;張慧;陳卓怡;藺磊
• 申請（專利權）人: 浙江大學山東工業技術研究院;山東求是農創農業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 徐關壽

1.基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，包括如下步驟：

（1）使大麥葉片被白粉病侵染，采集不同侵染時間的大麥葉片樣本的線陣列的拉曼光譜數據，所述的線陣列是指沿大麥主葉脈兩側，自葉尖部到葉根部，按直線均勻采集n個點，得到共2n個點的拉曼光譜數據；并對各個樣本中的各色素含量進行檢測；

（2）步驟（1）采集的拉曼光譜，選取700-1700cm^-1具有特征拉曼位移的區域，并運用SWiMA的方法去除基線，然后計算得到樣本的平均光譜，并對所得的拉曼峰位置進行歸屬，確定色素對應的特征拉曼位移；

（3）以各個色素成分對應的特征拉曼位移的峰值強度為自變量，以色素含量為因變量，建立多元線性回歸模型，得到各色素含量的定量模型公式；

（4）將待測大麥葉片樣本采用逐點掃描方式，獲取樣本的面陣拉曼光譜數據，采集參數與步驟（1）保持一致；從采集到的各像素點拉曼光譜中，選取700-1700cm^-1具有特征拉曼位移的區域，運用SWiMA的方法去除基線，然后直接運用步驟（3）得到的各色素含量的定量模型公式，分別計算各像素點的色素含量預測值，從而實現在白粉病侵染下，大麥葉片各色素空間分布的可視化。

2.如權利要求1所述的基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，其特征在于：步驟（1）中，步驟（1）中，大麥葉片樣本的侵染時間設為6個時間段，即0天和3-7天。

3.如權利要求1或2所述的基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，其特征在于：步驟（1）中，步驟（1）中，掃描參數為：激光功率150mw，積分時間4s，每個點采集2次輸出平均值。

4.如權利要求3所述的基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，其特征在于：步驟（4）中，采集的空間分辨率設為0.5mm，激光功率150mw，積分時間4s。

5.如權利要求1或2所述的基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的色素為葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素。

6.如權利要求5所述的基于拉曼光譜的白粉病脅迫下大麥葉片色素成像方法，其特征在于：步驟（1）中，通過乙醇提取比色法獲得大麥葉片中的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量。