[發(fā)明專利]一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010461393.1
• 申請日: 2020-05-27
• 公開（公告）號: CN111781281A
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉柱;陳碧蓮;王峰;徐瀟穎;趙超群;華穎;陳萬勤;梁晶晶;周霞;王一涵
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

1.一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

1)制備苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別注入高效液相色譜儀-紫外或二極管陣列紫外檢測器進(jìn)行分析，得到各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖，再分別以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和測得相應(yīng)濃度的色譜峰面積的值繪制關(guān)系曲線圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程；

2)稱取糯米類食品的樣品于燒杯中，加入蒸餾水，在溫度為55℃-65℃的水浴條件下震蕩，加入酶活活性為2000-7000U/g的中溫淀粉酶酶解，中溫淀粉酶與樣品的質(zhì)量比為50mg~150mg:5g，酶解時間不少于3h，得到酶解液；

3)在步驟2)的酶解液中加入亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液，其中，亞鐵氰化鉀溶液的濃度為92g/L，亞鐵氰化鉀溶液與樣品的體積質(zhì)量比為2~3mL：5g，乙酸鋅溶液的濃度為183g/L，乙酸鋅溶液與樣品的體積質(zhì)量比為2~3mL:5g，混勻，定容，離心，離心轉(zhuǎn)速為10000-15000r/min，離心時間為5-10min，得到上清液；將上清液經(jīng)過濾膜過濾，得到濾液；

4)將步驟3)的濾液注入高效液相色譜儀-紫外或二極管陣列紫外檢測器中進(jìn)行檢測，分別測得樣品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和安賽蜜的色譜峰面積，得到的色譜峰面積的值通過步驟1)中對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程計算得到各個待測組分的濃度c；

5)根據(jù)以下?lián)Q算公式分別得到樣品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和安賽蜜的含量：

式中：

X—待測組分在樣品中的含量，單位為克每千克(g/kg)；

c—通過標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程計算得到的各個待測組分的濃度，單位為毫克每升(mg/L)；

V—樣品溶液的定容體積，單位為毫升(mL)；

m—樣品稱樣量，單位為克(g)；

1000—單位轉(zhuǎn)換系數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于，所述的中溫淀粉酶為適用于55℃-65℃條件下的α-淀粉酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于，所述步驟1)中的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液的具體配制方法如下：

分別準(zhǔn)確移取25、50、100、250、500μL濃度為1000mg/L的苯甲酸儲備液于5個10mL容量瓶中，用水定容至刻度，同樣地，分別配置山梨酸、糖精鈉、安賽蜜的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到四種待測組分的濃度梯度均為2.5、5、10、25、50mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液，將不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別注入高效液相色譜儀-紫外或二極管陣列紫外檢測器進(jìn)行分析，測得相應(yīng)濃度的色譜峰面積的值，其中色譜條件為：

a)色譜柱：Waters SunFire C18，5 μm，4.6mm×250mm；

b)流動相：A相：甲醇，B相：20mmol/L的乙酸銨水溶液，其中，A相和B相的體積比為5:95；

c)進(jìn)樣量：10μL；

d)流速： 1.0mL/min；

e)柱溫：35-40℃；

f)檢測器的波長：230nm；

以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的色譜峰面積的值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別繪制苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與色譜峰面積的值的關(guān)系曲線圖, 得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)的具體步驟為：

稱取5g糯米類食品的樣品于燒杯中，加入10mL蒸餾水中，在溫度為60℃的水浴條件下震蕩，震蕩速度為150r/min，加入酶活活性為2000U/g中溫淀粉酶酶解，所述的中溫淀粉酶與所述樣品的質(zhì)量比為100 mg:5g，酶解時間為4h，得到酶解液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于，所述步驟3)的具體步驟為：

以5g糯米類食品的樣品為例，在步驟2)的酶解液中加入3mL濃度為92g/L亞鐵氰化鉀溶液和183g/L乙酸鋅溶液，混勻，定容至50mL，離心，離心轉(zhuǎn)速為15000r/min，離心時間為10min，得到上清液；將所述上清液經(jīng)過0.22μm的水相微孔濾膜過濾，得到濾液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糯米類食品中防腐劑和甜味劑的檢測方法，其特征在于，所述步驟4) 的高效液相色譜儀-紫外或二極管陣列紫外檢測器的色譜條件為：

a)色譜柱：Waters SunFire C18，5μm，4.6mm×250mm；

b)流動相：A相：甲醇，B相：20mmol/L的乙酸銨水溶液，其中，A相和B相的體積比為5:95

c)進(jìn)樣量：10-20μL；

d)流速：0.8-1.0mL/min；

e)柱溫： 35-40℃；

f)檢測器的波長：230nm。