[發(fā)明專利]一種利用基于樹莓狀金基底的拉曼儀檢測鴨肉中殘留抗生素的方法

在審

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• 申請日: 2020-05-22
• 公開（公告）號: CN111426678A
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳義平;劉藝;程正忠;唐學飛;劉洪林
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥學院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28
• 代理公司: 合肥輝達知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34165
• 代理人: 汪守勇

一種利用基于樹莓狀金基底的拉曼儀檢測鴨肉中殘留抗生素的方法，利用鴨肉提取液稀釋抗生素標準溶液，得到了含不同濃度抗生素的模擬液，將其與樹莓狀金溶膠混合，利用便捷式拉曼光譜儀進行掃描，得到該濃度范圍的SERS光譜圖；然后與標準溶液的SERS譜圖的主要特征峰進行對比指認，同時計算模擬液的SERS峰積分強度與呋喃西林、呋喃妥因濃度之間的線性關(guān)系，判斷檢測范圍和下限。制備的樹莓狀金溶膠因其獨特的結(jié)構(gòu)使得其在大粒徑下仍具有很強的拉曼增強效果，很好的滿足了785nm便攜式拉曼儀對基底的要求?？捎糜跈z測鴨肉中的呋喃西林、呋喃妥因含量，且檢測限為0.05mg/L，相較于普通金基底的檢測下限增強了100倍。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種利用基于樹莓狀金基底的拉曼儀檢測鴨肉中殘留抗生素的方法，具體是指利用便捷式拉曼儀對鴨肉中殘留的抗生素進行定性、定量檢測的方法，屬于食品安全、藥品檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

硝基呋喃類抗生素主要是指呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮，對大多數(shù)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、某些真菌和原蟲均有殺滅作用。這類抗生素曾經(jīng)被廣泛用于家禽、家畜、水產(chǎn)、蜂等動物傳染病的預防與治療，部分品種具有促生長的作用，曾被用作藥物飼料添加劑。但近代有關(guān)研究證明，硝基呋喃類藥物及其代謝物具有較強的毒副作用，能誘導有機體基因突變，有致畸胎的誘導作用，且能誘發(fā)癌癥，因而引起了人們的高度重視。我國衛(wèi)生部于2010年3月22日將硝基呋喃類藥物列入可能違法添加的非食用物質(zhì)黑名單。但最新調(diào)查顯示，每年約有6000噸抗生素用于飼料添加劑，25％的抗生素被動物機體吸收，我國仍面臨抗生素監(jiān)管難題。

隨著社會對畜禽中抗生素污染的重視，SERS作為一種新興的光譜分析技術(shù)，近年來在食品、臨床、藥品檢測領(lǐng)域飛速發(fā)展。SERS分析技術(shù)具有操作簡單、檢測快速、成本低廉的特點。目前市場通用的便攜式拉曼儀使用的激發(fā)光為785nm，普通的金、銀溶膠因尺寸增長而SERS效果減弱，限制了其在便攜式拉曼儀中的使用，便攜式拉曼儀的檢測靈敏度也一直難以突破。

本發(fā)明將樹莓狀金溶膠應(yīng)用于便攜式拉曼儀中以實現(xiàn)對鴨肉中殘留抗生素的檢測，其操作簡單便捷、靈敏度高、成本低，可以廣泛應(yīng)用于各種家禽養(yǎng)殖及其加工領(lǐng)域的抗生素殘留檢測。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題為提供一種利用基于樹莓狀金基底的拉曼儀檢測鴨肉中殘留抗生素的方法，該方法操作簡單便捷、靈敏度高、成本低，可快速對食品中硝基呋喃類抗生素進行定性定量分析及檢測。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：一種利用基于樹莓狀金基底的拉曼儀檢測鴨肉中殘留抗生素的方法，步驟如下：

1)、制備樹莓狀金溶膠：采用檸檬酸鈉還原硝酸銀得到銀納米溶膠作為種子溶液備用；以十六烷基三甲基溴化銨溶液、氯金酸、超純水，混勻后加入L-抗壞血酸溶液，搖勻，混合溶液由淡黃色變?yōu)闊o色作為生長液；將銀種子溶液加入生長液中反應(yīng)，得到表面粗糙、部分空心的樹莓狀金溶膠；

2)、鴨肉預處理：剔膜鴨肉與乙酸乙酯混合渦旋、超聲、離心后取上清液，殘留物重復提取一次，將兩次提取得到的上清液合并，加入正己烷和二氯甲烷渦旋、離心，加熱至干，再用丙酮定容，最后用有機濾膜過濾得到鴨肉提取液；

3)、標準溶液的SERS檢測：將配制的待測呋喃西林、呋喃妥因標準液分別與樹莓狀金基底混合并滴加在硅片上，用激發(fā)光源為785nm的激光拉曼光譜儀進行掃描，分別得到呋喃西林和呋喃妥因標準溶液的SERS光譜圖；

4)、模擬液的SERS檢測：取呋喃西林、呋喃妥因分別加入至鴨肉提取液中，配制多組梯度濃度系列的呋喃西林鴨肉提取液、呋喃妥因鴨肉提取液作為模擬液，將模擬液與樹莓狀金溶膠基底混合并滴加在硅片上，用激發(fā)光源為785nm的激光拉曼光譜儀進行掃描，得到該系列濃度范圍的SERS光譜圖；然后分別與呋喃西林標準溶液、呋喃妥因標準溶液的SERS譜圖的主要特征峰進行對比指認，同時計算模擬液的SERS峰積分強度與呋喃西林、呋喃妥因濃度之間的線性關(guān)系，判斷檢測范圍和下限。