[發(fā)明專利]蛋白質(zhì)IbEGF及其相關(guān)生物材料和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010434935.6
• 申請(qǐng)日: 2020-05-21
• 公開（公告）號(hào): CN111378021B
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉慶昌;翟紅;何紹貞;趙寧;周媛媛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82;A01H6/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

本發(fā)明公開了蛋白質(zhì)IbEGF及其相關(guān)生物材料和應(yīng)用。本發(fā)明首先公開了一種蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)為氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白質(zhì)或SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的N端或/和C端連接蛋白標(biāo)簽得到的融合蛋白。本發(fā)明進(jìn)一步公開了上述蛋白質(zhì)相關(guān)的生物材料及應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了IbEGF蛋白及其編碼基因，并將IbEGF蛋白的編碼基因?qū)敫适碇校玫竭^(guò)表達(dá)IbEGF的轉(zhuǎn)基因甘薯植株，將轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行干旱脅迫處理，轉(zhuǎn)基因株系抗旱性增強(qiáng)，在提高植物抗旱研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及蛋白質(zhì)IbEGF及其相關(guān)生物材料和應(yīng)用。

背景技術(shù)

非生物脅迫給中國(guó)農(nóng)業(yè)帶來(lái)的危害非常嚴(yán)重，其中干旱與土壤鹽堿化是限制中國(guó)農(nóng)業(yè)可持續(xù)性發(fā)展的主要因素，是導(dǎo)致作物減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)的兩個(gè)重要環(huán)境因素。中國(guó)的干旱面積占國(guó)土面積的50％，因此，培育抗干旱品種是抵御干旱、保證產(chǎn)量和品質(zhì)的有效途徑。轉(zhuǎn)基因分子育種技術(shù)是植物在脅迫條件下通過(guò)分子手段來(lái)提高植物對(duì)逆境抗性的重要手段。這種方法具有選育速度快，易于獲得陽(yáng)性植株，且具有較好的遺傳穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)，已成為獲得高抗植株的主要手段。但是到目前為止，獲得的植物抗干旱基因還是太少，還不能滿足改良植株產(chǎn)量和品質(zhì)分子設(shè)計(jì)的需要。所以植物抗干旱基因工程在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和商業(yè)上的應(yīng)用受到很大限制。

因此，克隆獲得高效的抗干旱基因，并分析其對(duì)植物抗干旱能力的影響是植物抗干旱基因工程的研究重點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題為如何有效提高植物抗旱性。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明首先提供了一種蛋白質(zhì)，名稱為IbEGF蛋白或蛋白質(zhì)IbEGF，來(lái)源于甘薯(Ipomoea batatas)，為如下A1)或A2)或A3)任一所示：

A1)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白質(zhì)；

A2)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的N端或/和C端連接蛋白標(biāo)簽得到的融合蛋白；

A3)將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與A1)所示的蛋白質(zhì)具有90％以上的同一性且功能相同的蛋白質(zhì)。

其中，SEQ ID NO.1由83個(gè)氨基酸殘基組成。

上述蛋白質(zhì)可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。

上述蛋白質(zhì)中，蛋白標(biāo)簽(protein-tag)是指利用DNA體外重組技術(shù)，與目的蛋白一起融合表達(dá)的一種多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表達(dá)、檢測(cè)、示蹤和/或純化。所述蛋白標(biāo)簽可為Flag標(biāo)簽、His標(biāo)簽、MBP標(biāo)簽、HA標(biāo)簽、myc標(biāo)簽、GST標(biāo)簽和/或SUMO標(biāo)簽等。

上述蛋白質(zhì)中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用國(guó)際互聯(lián)網(wǎng)上的同源性檢索站點(diǎn)測(cè)定氨基酸序列的同一性，如NCBI主頁(yè)網(wǎng)站的BLAST網(wǎng)頁(yè)。例如，可在高級(jí)BLAST2.1中，通過(guò)使用blastp作為程序，將Expect值設(shè)置為10，將所有Filter設(shè)置為OFF，使用BLOSUM62作為Matrix，將Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分別設(shè)置為11，1和0.85(缺省值)并進(jìn)行檢索一對(duì)氨基酸序列的同一性進(jìn)行計(jì)算，然后即可獲得同一性的值(％)。

上述蛋白質(zhì)中，所述90％以上的同一性可為至少91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

本發(fā)明還提供蛋白質(zhì)IbEGF的下述任一中的應(yīng)用：

B1)調(diào)控植物抗旱性；

B2)制備調(diào)控植物抗旱性的產(chǎn)品；

B3)提高植物抗旱性；

B4)制備提高植物抗旱性的產(chǎn)品；