[發明專利]一種芋莖尖超低溫保存方法

在審

• 申請號: 202010434693.0
• 申請日: 2020-05-21
• 公開（公告）號: CN113693060A
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 張金梅;陳曉玲;辛霞;盧新雄;尹廣鹍;何娟娟
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院作物科學研究所
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 魏少偉

1.一種芋莖尖超低溫保存方法，包括：利用含有還原型谷胱甘肽的預培養液對芋莖尖進行預處理，得到預處理的芋莖尖；將所述預處理的芋莖尖于超低溫環境中保存，實現芋莖尖的超低溫保存。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述預培養液由溶質和溶劑組成，所述溶劑為MS液體培養基，所述溶質及其在所述預培養液中的濃度分別為0.1-0.2mmol/L還原型谷胱甘肽和0.3mol/L蔗糖。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述預處理在黑暗中進行；和/或，所述預處理的時間為2天。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：將所述預處理的芋莖尖于超低溫環境中保存包括：

a1)將所述預處理的芋莖尖利用裝載液進行處理，得到裝載液處理的芋莖尖；所述裝載液由溶質和溶劑組成，所述溶劑為MS液體培養基，所述溶質及其在所述裝載液中的濃度分別為2.0mol/L甘油和0.4mol/L蔗糖；

a2)將所述裝載液處理的芋莖尖于超低溫環境中保存，實現芋莖尖的超低溫保存。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：將所述預處理的芋莖尖利用裝載液進行處理的時間為20分鐘。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于：步驟a2)包括：

a21)將所述裝載液處理的芋莖尖利用PVS2玻璃化保護劑處理，得到保護劑處理的芋莖尖；所述PVS2玻璃化保護劑由溶質和溶劑組成，所述溶劑為MS液體培養基，所述溶質及其在所述PVS2玻璃化保護劑中的濃度分別為3.26mol/L甘油、2.42mol/L乙二醇、1.9mol/L二甲基亞砜和0.4mol/L蔗糖；

a22)將所述保護劑處理的芋莖尖于超低溫環境中保存，實現芋莖尖的超低溫保存。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：將所述裝載液處理的芋莖尖利用PVS2玻璃化保護劑處理的時間為40分鐘；

和/或，將所述裝載液處理的芋莖尖利用PVS2玻璃化保護劑處理在0℃下進行。

8.成套試劑，包括權利要求1或2中所述預培養液。

9.根據權利要求8所述的成套試劑，其特征在于：所述成套試劑還包括權利要求4中所述裝載液和/或權利要求6中所述PVS2玻璃化保護劑。

10.權利要求8或9所述的成套試劑在芋莖尖超低溫保存中的應用；

或，權利要求8或9所述的成套試劑在制備芋莖尖超低溫保存產品中的應用。