[發明專利]唾液葡萄糖檢測試紙及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010426719.7
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111595839A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 戴慶;竇倩;胡德波
• 申請（專利權）人: 中科康磁醫療科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 北京市英智偉誠知識產權代理事務所(普通合伙) 11521
• 代理人: 劉丹妮;姚望舒

本發明提供了一種唾液葡萄糖檢測試紙，所述唾液葡萄糖檢測試紙包括酶層和顯色層，所述酶層包括葡萄糖氧化酶、辣根過氧化物酶和維生素C氧化酶。還提供了其制備方法和應用。本發明涉及一款用于快速檢測唾液中葡萄糖含量的試紙，用于體外檢測，對于口腔疾病的早期預防、初步判斷具有重要的意義，同時在糖尿病預防方面也具有一定的積極意義。

技術領域

本發明屬于醫療器械領域，具體涉及一種唾液葡萄糖檢測試紙及其制備和應用方法。

背景技術

目前已有大量研究表明唾液葡萄糖(簡稱唾糖)含量的升高對人體健康有顯著的負面作用。一方面，唾糖含量升高會破壞口腔環境，例如使口腔滲透壓升高，pH降低，唾液流速減慢從而削弱其自潔作用等；另一方面，唾糖含量升高為變形鏈球菌、念珠菌、乳桿菌等菌群的生長提供了營養物質，造成口腔微生物的增殖。這兩方面的因素共同導致了口干癥、牙周炎、牙齦炎和齲齒等口腔疾病。同時，也有一些研究表明糖尿病患者的唾糖濃度與其血糖水平呈正相關，導致其罹患口腔疾病的概率高于正常人。

通常情況下，口腔疾病是緩慢發生的，早期多無明顯臨床癥狀，不易被患者察覺。等到出現疼痛等不適癥狀時就已經到了疾病的中晚期，治療起來很復雜，患者也會遭受更大的痛苦，花費更多的費用。因此唾糖含量的測定對口腔疾病和糖尿病的預防和治療具有重要的意義。

唾液成分復雜(如蛋白質：粘蛋白、白蛋白、球蛋白；酶：唾液淀粉酶、麥芽糖酶、磷酸脂酶；無機成分：鈉、磷、鉀、鎂、氧化物和硫酸鹽、碳酸鹽等；此外還有尿素、尿酸和微量的氨、粘液素、微量元素、白細胞、上皮細胞、痕量物質、微生物等)，且理論上其葡萄糖濃度僅為血液中葡萄糖濃度的1/50-1/100(1.98-119.99mg/L),因此目前主要依靠高精度的儀器實現唾糖的檢測，例如氣相色譜、液相色譜、離子色譜、氣/液-質聯用等。這些儀器設備價格昂貴，操作復雜，很難實現即時檢測，因而其應用受到限制。文獻中也有報道通過電化學、光學方法實現唾糖檢測，但是由于高非特異性干擾，這兩種方法都難以實現真實唾液中葡萄糖的準確檢測。現有技術基于硼酸基水凝膠的石英晶體微天平傳感器能夠實現唾糖的特異性檢測。該系統將唾液中的葡萄糖濃度信號轉化為石英晶振傳感器的頻率信號，從而獲得唾液葡萄糖濃度。石英晶體微天平唾糖傳感器的優點是快速精準，但是因為其樣品前處理過程復雜，需要專業人士才可完成檢測。

試紙法檢測唾糖具有操作簡便、價格低廉等優點，在唾糖檢測方面具有較好的應用前景。目前已有部分現有技術報道成功合成出測試葡萄糖的試紙條，利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖產生過氧化氫，在過氧化氫酶的催化作用下將無色的鄰-聯二茴香胺氧化成為有色的產物從而使試紙顯色，通過測定試紙顏色變化進行葡萄糖的定量檢測。雖然利用中空的聚合物納米纖維包覆酶，具有酶用量少、儲存穩定性高等優點，但是其檢測對象為血糖，只能對高濃度的葡萄糖有響應，在10mmol/L才有明顯的顏色變化，不能滿足低濃度唾糖的檢測需求?，F有技術還利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖產生過氧化氫，在過氧化氫酶的催化作用下將10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪催化成為有色的產物，通過肉眼觀察顏色的變化定性判斷出葡萄糖的高低。但目前只能定性區別唾液中葡萄糖含量的高低?，F有技術通過膜過濾血液，利用色原試劑、助顯色劑與H₂O₂的顯色反應檢測血糖中的葡萄糖，但其同樣只能對高濃度的葡萄糖有響應。

發明內容

因此，本發明的目的在于克服現有技術中的缺陷，提供一種唾液葡萄糖檢測試紙及其制備和應用方法。

為實現上述目的，本發明的第一方面提供了一種唾液葡萄糖檢測試紙，所述唾液葡萄糖檢測試紙包括酶層和顯色層，所述酶層包括葡萄糖氧化酶、辣根過氧化物酶和維生素C氧化酶；

優選地，所述酶層中葡萄糖氧化酶、辣根過氧化物酶和維生素C氧化酶的酶活力單位配比為：50～200：50～200：1～10，優選為50～150：100～200：1～5，最優選為100:150:2；和/或