[發(fā)明專利]lncRNA作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010426704.0
• 申請(qǐng)日: 2020-05-19
• 公開（公告）號(hào): CN111560427A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱雪萍;朱曉黎;汪健;劉剛;胡筱涵;王華偉;耿海峰;許云云;方芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 孫周強(qiáng)

本發(fā)明公開了lncRNA作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物的應(yīng)用。lncRNA有組織特異性與時(shí)空特異性，不同組織之間的lncRNA表達(dá)量不同，同一組織或器官在不同生長階段，其中的lncRNA表達(dá)量也會(huì)變化，本發(fā)明首次公開了lncRNA作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物，利用臨床上比較容易直接獲得的全血標(biāo)本，結(jié)合設(shè)計(jì)的引物對(duì)進(jìn)行qRT?PCR驗(yàn)證lncRNA的差異表達(dá)，具有快速、簡單、省時(shí)、檢測(cè)靈敏度高，樣品消耗少的優(yōu)點(diǎn)，是非常適合的利用差異表達(dá)的lncRNA診斷新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病的方法；尤其是，本發(fā)明通過平行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了lncRNA作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物的準(zhǔn)確性以及特異性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種制備新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性lncRNA的方法。

背景技術(shù)

腸外營養(yǎng)(parenteral nutrition, PN)對(duì)不能通過正常腸道方式來滿足生長的新生兒帶來了革命性關(guān)愛。 美國自60 年代首次報(bào)道長期 PN應(yīng)用于一例新生女嬰，至今已有數(shù)十萬患者依賴 PN得以生存。但長時(shí)間(＞2 周) PN應(yīng)用也存在許多相關(guān)問題, 腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病 (total parenteral nutrition-associated liverdisease, PNALD) 是一種最常見的并發(fā)癥，隨著長時(shí)間PN的應(yīng)用，PNALD 發(fā)生率增加，主要表現(xiàn)為肝脂肪變性、膽汁淤積和轉(zhuǎn)氨酶升高。約有 30％-60％的患兒因長期 PN 發(fā)生 PNALD，伴有肝功能異常和肝細(xì)胞損害，嚴(yán)重者發(fā)展為肝硬化危及生命。而新生兒發(fā)生 PNALD 更早、肝功能下降更快，死亡率高達(dá)38%～51%。因此，PNALD 是嚴(yán)重威脅新生兒健康的重大疾病，如何防治該病是新生兒臨床焏待解決的問題。PNALD臨床主要表現(xiàn)為黃疸、肝脾腫大，可有白陶土樣大便，肝功等化驗(yàn)檢查多提示丙氨酸轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、血總膽紅素、直接膽紅素升高。

lncRNA是一類轉(zhuǎn)錄本長度大于200bp的非編碼RNA產(chǎn)物，在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后和染色體修飾等多個(gè)層面，調(diào)控胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和分化等各種生命活動(dòng)，其異常表達(dá)與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。lncRNA有組織特異性與時(shí)空特異性，不同組織之間的lncRNA表達(dá)量不同，同一組織或器官在不同生長階段，其中的lncRNA表達(dá)量也會(huì)變化，lncRNA可從染色質(zhì)重塑、轉(zhuǎn)錄調(diào)控及轉(zhuǎn)錄后加工等多種層面實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。lncRNA啟動(dòng)子同樣可以結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子，如Oct3/4、Nanog、CREB、Sp1、c-myc、Sox2與p53，局部染色質(zhì)組蛋白同樣具有特征性的修飾方式與結(jié)構(gòu)特征，序列上保守性較低，只有約12%的lncRNA可在人類之外的其它生物中找到，其作用機(jī)制非常復(fù)雜，至今尚未完全清楚，比如已有許多研究證實(shí)了miRNAs參與調(diào)節(jié)TGFβ表達(dá)量和EMT過程，但參與此過程的lncRNA并不清楚。另外，一些在線網(wǎng)站比如starBase 2.0網(wǎng)站預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率低，比如現(xiàn)在已經(jīng)比較明確的GAS5和miRNA21都預(yù)測(cè)不到，而且人血清中存在多達(dá)1400個(gè)lncRNA，還有變化，導(dǎo)致lncRNA無法有效利用，因此針對(duì)新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病，研發(fā)合適的特異性lncRNA作為標(biāo)志物在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、作為疾病診斷標(biāo)志物等方面具有重要的研究和臨床意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種作為針對(duì)新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物的lncRNA及其應(yīng)用。本發(fā)明首次公開了lncRNA RP11-372K14.2作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物，利用臨床上比較容易直接獲得的全血標(biāo)本，結(jié)合設(shè)計(jì)的引物對(duì)進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證lncRNA的差異表達(dá)，具有快速、簡單、省時(shí)、檢測(cè)靈敏度高，樣品消耗少的優(yōu)點(diǎn)，是一種準(zhǔn)確特異診斷新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

lncRNA作為新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物的應(yīng)用；所述lncRNA為lncRNARP11-372K14.2。

lncRNA在制備新生兒腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病特異性標(biāo)志物中的應(yīng)用；所述lncRNA為lncRNA RP11-372K14.2。