[發明專利]METTL2基因在制備檢測結直腸癌氟尿嘧啶類藥物治療敏感性的試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 202010424466.X
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111518909B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 劉然義;彭綺華;岳欣
• 申請（專利權）人: 中山大學腫瘤防治中心（中山大學附屬腫瘤醫院;中山大學腫瘤研究所）
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;裘暉

本發明屬于生物醫藥技術領域，公開了METTL2基因在制備檢測結直腸癌氟尿嘧啶類藥物治療敏感性的試劑盒中的應用。該應用是基于本發明發明人發現，METTL2蛋白表達能增強結直腸癌細胞對5?FU的敏感性，結直腸癌患者腫瘤組織高表達METTL2與5?FU化療的良好預后呈正相關。從而，臨床醫生可以通過結直腸癌患者METTL2基因的表達情況，確定結直腸癌患者是否適用氟尿嘧啶類藥物治療，制定個性化治療方案。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，特別涉及METTL2基因在制備檢測結直腸癌氟尿嘧啶類藥物治療敏感性的試劑盒中的應用。

背景技術

結直腸癌(Colorectal Cancer，CRC)在世界范圍內的發病率和死亡率均居全球所有類型腫瘤的第三位。近幾十年隨著我國經濟和科學技術發展，大幅度提高人們的生活水平同時伴隨西式飲食模式的普及，結直腸癌的發病率逐年攀升。自20世紀50年代，5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)作為結直腸癌治療的基本藥物應用于臨床以來，5-FU和Capecitabine(口服藥)等氟尿嘧啶類藥物(FU)至今仍是不同分期結直腸癌患者的一線化療方案(例如，CAPEOX，FOLFOX，FOLFIRI，XELOX等)的重要組分。然而5-FU的單藥有效率只有10-15％，聯合亞葉酸鈣(Leucovorin，LV)有效率可從11％提高到25％，但總體有效率仍然偏低，腫瘤對FU的敏感性成為制約患者化療療效及預后最重要的因素之一。因此我們亟需深入研究如何有效評估結直腸癌患者對FU的敏感性，以便提高藥物有效性、控制FU耐藥的產生。尋找特異性調控FU代謝及敏感或耐藥相關基因，以便臨床醫生根據不同結直腸癌患者制定更合理的個性化治療方案，對于優化醫療資源結構具有極為重要意義。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供METTL2基因在制備檢測結直腸癌氟尿嘧啶類藥物治療敏感性的試劑盒中的應用。

本發明的上述目的通過以下技術方案予以實現：

METTL2基因在制備檢測結直腸癌氟尿嘧啶類藥物治療敏感性的試劑盒中的應用。是基于本發明發明人發現，METTL2能增強結直腸癌細胞對5-FU的敏感性，結直腸癌患者腫瘤組織中高表達METTL2與5-FU化療的良好預后呈正相關。從而，臨床醫生可以通過結直腸癌患者腫瘤組織中METTL2基因的表達情況，確定結直腸癌患者是否適用氟尿嘧啶類藥物治療，制定個性化治療方案。

所述的氟尿嘧啶類藥物優選為5-FU和Capecitabine中的至少一種；更優選為5-FU。

所述的試劑盒包括檢測METTL2 mRNA量的試劑和檢測METTL2蛋白量的試劑中的一種或兩種。

所述的檢測METTL2 mRNA量的試劑優選為能進行反轉錄-實時熒光定量PCR(RT-qPCR)的試劑。

所述的能進行反轉錄-實時熒光定量PCR的試劑包括依據METTL2 mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的引物；優選為包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1～40所示的20對引物對中的任一對；核苷酸序列如SEQ ID NO.1～40所示的引物名稱中第一個數字相同為同一對引物。

所述的能進行反轉錄-實時熒光定量PCR的試劑還包括依據內參基因mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的引物；優選為包括依據內參基因mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的引物；更優選為包括核苷酸序列如SEQ ID NO.41～42所示的引物對。

所述的能進行反轉錄-實時熒光定量PCR的試劑優選為組合試劑A和組合試劑B中的至少一種；其中，組合試劑A為依據探針法得到的組合試劑，包括但不限于：依據METTL2mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的引物、依據METTL2 mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的探針、依據內參基因mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的引物、依據內參基因mRNA序列設計的用于實時熒光定量PCR的探針；