[發明專利]人類17個常染色體STR及28個Y染色體STR基因座復合擴增檢測成套試劑與應用

有效

• 申請號: 202010423850.8
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111621499B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 余政梁;李萬水;孫輝;張建;馬溫華;莫曉婷
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6876
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 魏少偉

本發明公開了人類17個常染色體STR及28個Y染色體STR基因座復合擴增檢測成套試劑與應用。本發明公開的成套試劑由序列表中序列1?86所示的86條單鏈DNA組成，序列號為偶數的單鏈DNA標記有熒光物質。實驗證明，本發明的成套試劑所有擴增片段均小于580bp，可以用于個體識別，親緣關系檢索、分析、家系排查，對儀器設備的要求不高，并可在涉及混合、常量、微量及降解檢材的案件中進行應用，個體識別率高，靈敏度高，具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中，人類17個常染色體STR及28個Y染色體STR基因座復合擴增檢測成套試劑與應用。

背景技術

STR(短串聯重復序列，short tendem repreat)技術最早被英國法庭科學服務部(FSS)用于案件偵破工作；第一個STR復合擴增系統包括TH01、FES\FPS、vWA和F13A1四個基因座，匹配概率約為萬分之一。之后該復合系統被不斷完善，系統中所包含的STR基因座數目也不斷增加(從6個到10個)。與此同時，美國聯邦調查局(FBI)也根據自身辦案需求構建了包含13個STR基因座的聯合DNA索引系統(Combined DNA Index System，CODIS)：D3S1358、vWA、FGA、D8S1179、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317、D16S539、TH01、TPOX、CSF1PO和D7S820。在研究中，有60個常染色體STRs最為常見。

在我國，常染色體STR檢驗和Y-STR檢驗已經有很多年的歷史，在過去十年，有很多常染色體STR檢驗和Y-STR檢驗的試劑盒相繼被開發并應用于實戰，隨著DNA技術的發展，為了更好地應對恐怖襲擊，個體識別、國際間數據共享等問題，對檢驗體系提出了更高的要求，即在一個體系內包含盡可能多的基因座位點能對混合檢材、降解檢材等進行有效分析。隨著STR-PCR技術的發展，越來越多的復合擴增體系被研究開發，這些復合體系一般包含24-27個基因座位點。公安部物證鑒定中心最先開始了常染色體STRs試劑的研發工作，先后推出了DNAtyper15，DNAtyper19，DNAtyper21等試劑盒及其標準物質，不僅為公安機關偵查破案、DNA數據庫建設提供了強有力的支持，還打破了國外常染色體STRs試劑的壟斷地位，引領了國內常染色體STRs試劑的研發和生產。常染色體STRs檢驗由于能達到同一認定，因此在個體識別、親緣關系鑒定中發揮了重要作用，在案件偵破中，常染色體STRs檢驗在證據鏈中有著舉足輕重的作用，因此常染色體STRs檢驗被廣泛應用于案件偵破中，此外，在我國DNA數據庫樣本檢驗中，常染色體STRs檢驗仍然是重點，目前我國的DNA數據庫總量已經達到8000萬，為案件的比對及串并提供了有力支持。目前國內外有多家公司都有常染色體STRs試劑盒，比如AB、Promega、中德美聯、閱微、海爾施等。

近年，Y-STRs檢驗的價值和作用逐漸顯現，到目前為止，有48個Y-STRs最為常見，Y-STRs由于其特殊的遺傳特點，常用于家系排查、親緣關系檢索(父系)，可以為案件偵破提供線索、確定偵查范圍，特別是隨著“甘肅白銀殺人案”、“山西絳縣殺人案”的偵破，Y-STRs一度成為研究熱點，各地公安機關也在規劃建立Y-STRs數據庫，其中河南的Y-STRs數據庫建設最早，為案件偵查提供了保障。公安部物證鑒定中心對Y-STR檢驗體系也進行了研究和開發，目前有DNAtyperY29復合擴增體系，已經廣泛應用于案件檢驗和Y建庫中。

常染色體STRs檢驗的優勢在于同一認定，但是不能單獨用在家系排查中，而Y-STRs在家系排查中有優勢，但是不能單獨用于個體識別和親緣關系分析，因此如果將常染色體STRs和Y-STRs結合在一起，既可以實現個體識別、親緣關系分析，又可以達到家系排查的目的。但是目前的多個聯合常染色體STR、Y-STR的復合擴增體系存在著如下問題：Y-STR位點少，在家系排查中的應用價值不大；部分位點的片段達到了650bp，在微量及降解檢材檢驗中存在不足；對檢測儀器有較高要求。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何檢測人類待測樣本是否來源于同一個體及同一家系。