[發明專利]一種液相色譜-串聯質譜法測定血漿中替諾福韋艾拉酚胺濃度的方法

在審

• 申請號: 202010420999.0
• 申請日: 2020-05-18
• 公開（公告）號: CN111595967A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 錢曉萍;祁慧昕;孫葉
• 申請（專利權）人: 蘇州必宜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
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1.一種液相色譜-串聯質譜法測定血漿中替諾福韋艾拉酚胺濃度的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）對血漿樣品進行前處理；

（2）采用液相色譜-串聯質譜法測定步驟（1）中經前處理后的血漿樣品中替諾福韋艾拉酚胺的濃度；

所述液相色譜-串聯質譜法包括色譜條件和質譜條件，其中：

所述色譜條件包括：以含0.1%甲酸的2mM醋酸銨水溶液為流動相A，以體積比為1:1的乙腈-甲醇為流動相B；梯度洗脫，洗脫程序為：0-0.3min，10% B相，0.3-1.5 min，10%-95%B相，1.5-4.0min，95% B相，4.0-4.6min，95%-10%B相，4.6-5.5min，10% B相；洗脫時間為5.5min；

所述質譜條件包括：離子源：電噴霧電離正離子檢測；噴霧氣溫度：550℃；霧化氣：60psi；加熱輔助氣：60 psi；氣簾氣：30 psi；碰撞氣：8 psi；噴霧電壓：5500 V；掃描時間：100ms；掃描方式：多反應監測；用于定量的離子反應分別為：m/z 477.2 ?346.1（替諾福韋艾拉酚胺）和m/z 482.3?351.2（替諾福韋艾拉酚胺-d5）；碰撞能量60 eV。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，對血漿樣品進行前處理的方法為：向100 μL血漿樣品中加入50 μL內標溶液，再加入300 μL乙腈，渦流振蕩5min，4℃條件下以3900 rpm速度離心10 min，取上清液100 μL加入300 μL去離子水，混勻后，取20.0 μL進行LC-MS/MS分析。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述內標溶液為50 ng/mL的替諾福韋艾拉酚胺-d5溶液。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述色譜條件還包括：分析柱為Eclipse Plus C18色譜柱，流速：0.65mL/min；進樣量：20.0 μL。