[發(fā)明專利]一種綴合物及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010420265.2
• 申請日: 2020-05-18
• 公開（公告）號: CN111760020B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 廖國超;劉中秋;楊德盈;練慶海;高玲強;吳鵬;蘇詩薇;曾莉茗;盧琳琳;王彩艷
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州中醫(yī)藥大學（廣州中醫(yī)藥研究院）
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/39;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文

本發(fā)明涉及一種綴合物及其制備方法和應用，屬于抗腫瘤糖疫苗研制技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的一種綴合物，其含有雙重激動劑與糖抗原Tn，所述雙重激動劑為TLR4受體激動劑和NKT細胞激動劑，所述TLR4受體激動劑為單磷酸化的脂質(zhì)A，所述NKT細胞激動劑為α?半乳糖神經(jīng)酰胺類似物。本發(fā)明所述的綴合物作為疫苗，能同時激活TLR4受體與NKT細胞，引起更強的針對糖抗原Tn的免疫反應，產(chǎn)生具有更高滴度、高親和力和具有記憶力的T細胞調(diào)節(jié)免疫反應，從而達到特異性殺死腫瘤細胞的目的。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種綴合物及其制備方法和應用，尤其涉及一種雙重激動劑與糖抗原Tn的綴合物及其制備方法和應用，所述雙重激動劑為TLR4受體激動劑和NKT細胞激動劑，屬于抗腫瘤糖疫苗研制技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

腫瘤相關(guān)的糖抗原(TACAs)在多種腫瘤細胞中有過量表達，其糖蛋白疫苗正處于臨床研究中，具有較好的發(fā)展前景。其中Thomsennouveau(Tn)抗原在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等惡性腫瘤細胞表面均異常過量表達，是糖抗原腫瘤疫苗設(shè)計的優(yōu)秀靶點。腫瘤相關(guān)的糖抗原(TACAs)一般屬于T細胞非依賴性抗原，只產(chǎn)生低親和力的IgM，具有免疫原性差和免疫耐受等缺點。因此，目前抗腫瘤糖疫苗面臨的主要挑戰(zhàn)是如何克服糖抗原的免疫耐受，增強其免疫原性，使機體產(chǎn)生高親和力的IgG抗體和免疫記憶，從而達到殺死腫瘤細胞的目的。經(jīng)典的策略是將糖抗原與載體蛋白綴合來增強其免疫原性，但糖蛋白疫苗有偶聯(lián)位點不確定、偶聯(lián)率不穩(wěn)定、組成成分復雜等缺點。

細菌脂多糖(Lipidpolysacchrides，LPS)疏水部分的Lipid?A是Toll樣受體4(TLR4)的激動劑，能靶向地結(jié)合TLR4并產(chǎn)生免疫反應，但其毒性過強。研究發(fā)現(xiàn)去掉LipidA結(jié)構(gòu)中1位磷酸(反應式如下所示)后的Monophosphoryl?lipid?A(MPLA)依然能靶向地與TLR4結(jié)合，毒性明顯降低而活性變化不明顯(MicrobesInfection,2002,4(9):915-926.)。其作為內(nèi)嵌佐劑與多種糖抗原結(jié)合來制備的抗腫瘤糖綴合物疫苗MPLA-Golob?H和MPLA-STn和MPLA-GM2，在無外加佐劑的情況下，都能在小鼠體內(nèi)更快速地產(chǎn)生高滴度的IgG抗體(Chemical?Science,2015,6:7112；Scientific?reports,2017,7:11403；BiomolecularChemistry,2014,12:3238)，

α-半乳糖神經(jīng)酰胺類似物(KRN7000)，是從一種海綿中分離出的天然α-GalGSL類似物，能激活NKT細胞產(chǎn)生免疫反應。目前，KPN7000對非小細胞肺癌患者、惡性實體瘤綜合治療均進入Ⅱ期臨床研究，其作為內(nèi)嵌佐劑綴合糖抗原的全合成疫苗KRN7000-Tn，KRN7000-sTn，無需外部佐劑的條件下，在小鼠體內(nèi)能更快速地產(chǎn)生特異性免疫應答，同時激活NKT細胞，高效地將IgM抗體同種型轉(zhuǎn)換成IgG(Organic?Letters,2017,19:456；Journal?of?medicinal?chemistry,2018,61:4918.)

為了解決上述糖蛋白疫苗的缺點，本發(fā)明選擇有發(fā)展?jié)摿ACAs中的Tn為研究靶點，選用TLR4激動劑MPLA和NKT細胞激動劑KRN7000類似物作為內(nèi)源性佐劑，制備一種含有TLR4受體和NKT細胞的雙重激動劑(MPLA和KRN7000)與Tn綴合的三組分疫苗(MPLA-Tn-KRN7000)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種雙重激動劑與糖抗原Tn的綴合物，所述雙重激動劑為TLR4受體激動劑單磷酸化的脂質(zhì)A(MPLA)和NKT細胞激動劑α-半乳糖神經(jīng)酰胺類似物(KRN7000)。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：一種綴合物，其特征在于，所述綴合物含有雙重激動劑與糖抗原Tn，所述雙重激動劑為TLR4受體激動劑和NKT細胞激動劑，所述TLR4受體激動劑為單磷酸化的脂質(zhì)A，所述NKT細胞激動劑為α-半乳糖神經(jīng)酰胺類似物；