[發明專利]一種高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統及其應用

有效

• 申請號: 202010415141.5
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN111569064B
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: 蒙青林;馬士蛟;張金菊;王紅光
• 申請（專利權）人: 北京國科融智生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 北京卓愛普專利代理事務所(特殊普通合伙) 11920
• 代理人: 王玉松;宋丹丹

本發明提供了一種高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統，該高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統主要是通過SPDP將磁小體與重組SPA進行偶聯制得；本發明提供的高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統具有較強的靶向性，尤其具有較強的靶向乳腺癌細胞(SK?BR?3)的性能。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，特別涉及一種高效靶向抗腫瘤藥物納米 載體系統及其應用。

背景技術

近年來，納米磁珠在醫學檢驗及治療領域的地位日漸突出，納米 材料的比表面積大，毒性低，具有靶向功能等特點，其在腫瘤診斷與 治療已經成為研究熱點，但是由于生物體環境比較復雜，納米材料進 入人體后，其表面會吸附一層或多層蛋白，稱之為蛋白冠(protein corona)，這一現象在納米顆粒進入血液30s內即可完成，有研究表 明，當納米材料連接轉鐵蛋白后進入生物環境中完全失去了靶向腫瘤 的能力。巨噬細胞表面含有多種受體，其能將納米材料識別并且作為 異物將其吞噬且激活NF-kB系統，進而產生一系列的反應。使靶向效 率降低或者失去靶向性，從而導致治療或者診斷效果大打折扣。

有研究報道，當納米材料與血漿和富含免疫球蛋白(IgG)的血漿 孵育后，發現巨噬細胞對富含IgG的血漿孵育后納米材料的吞噬要遠 遠大于對照組。另外有研究報道，非特異性吸附與化學偶聯相比，化 學偶聯的納米材料被巨噬細胞吞噬的效率反而升高，為什么化學耦合 時Fab區域的暴露程度會降低，賴氨酸氨基酸殘基的側鏈中存在伯胺 以及每條多肽鏈的N-末端。繪制小鼠IgG1的賴氨酸分布表明賴氨酸殘 基分布在Fc和Fab區域上(賴氨酸分布Fab：58％對Fc：42％)。這 是因為化學偶聯大部分應用抗體中的氨基，這樣不僅僅降低了抗體的 效價，更重要的是更多地把抗體的FC端暴露在外面讓巨噬細胞識別。

發明內容

為了解決以上技術問題，本發明使用重組SPA對抗體的FC端進行 特異性結合，是抗體正向偶聯在磁小體上，本發明提供了一種高效靶 向抗腫瘤藥物納米載體系統，該高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統主 要是通過SPDP將磁小體與重組SPA進行偶聯制得。

進一步地，該高效靶向抗腫瘤藥物納米載體系統是通過SPDP將磁 小體與重組SPA進行偶聯制得BMP-SPDP-RA，再將BMP-SPDP-RA與抗體 進行偶聯制得。

進一步地，納米載體系統是通過以下方法制備而成：

S1取SPDP溶解于二甲基亞砜中，制得溶液一，所述溶液一的濃度 為5-15mM；

S2取磁小體加入PBS中混勻制得溶液二，所述磁小體與所述SPDP 的質量比為0.5-1.5:1，所述磁小體在PBS中的濃度為1mg/0.8-1ml；

S3將溶液二加入到溶液一中超聲混勻并偶聯，制得第一混合溶液；

S4磁力吸附第一混合溶液，吸附后棄上清除去未結合的SPDP，再 用PBS清洗，制得BMP-SPDP；

S5將質量比為0.5-1.5:1的BMP-SPDP與重組SPA進行混合超聲混 勻偶聯，制得第二混合溶液；

S6磁力吸附第二混合溶液，洗掉未結合的重組SPA，再用PBS清 洗三遍，制得BMP-SPDP-RA。

其中，SPDP為雙功能試劑3-(2-吡啶二巰基)丙酸N-羥基琥珀酰亞 胺酯，BMP為磁小體，RA代表與BMP-SPDP偶聯的重組SPA。

進一步地，步驟S3和步驟S5的超聲條件為均為超聲1min，間歇 1min，重復30次。

進一步地，納米載體系統的制備方法還包括步驟S7將所述 BMP-SPDP-RA與抗體進行偶聯，步驟S7所述將BMP-SPDP-RA與抗體進 行偶聯具體包括以下步驟：

S71取質量比為0.5-1.5:1的BMP-SPDP-RA和抗體放置于37℃的 搖床中混合1.5-2.5h，制得第三混合液；