[發明專利]一種多肉丸葉海豹組培用組合培養基、多肉丸葉海豹組培方法和多肉丸葉海豹栽培方法

有效

• 申請號: 202010411746.7
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN111642394B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 廉玉姬;仝德斌;奕德磊;趙小梅;林光哲
• 申請（專利權）人: 臨沂大學;山東仙株生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G24/15;A01G31/00;A01G24/12;A01G24/28
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 董大媛

1.一種多肉丸葉海豹組培用組合培養基，其特征在于，由獨立分裝的預處理培養基、愈傷組織誘導培養基、增殖培養基、不定芽誘導培養基和生根壯苗培養基組成；

所述預處理培養基由MS培養基和10~20 mg/L細胞分裂素組成；

所述愈傷組織誘導培養基由MS培養基、蔗糖20~30 g/L、瓊脂6.5 ~8 g/L、6-BA 0.5~3.0 mg/L和NAA 0.5 mg/L組成；

所述增殖培養基由1/2MS或3/4 MS或MS培養基、20~30 g/L蔗糖、1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IBA和6.5~8 g/L瓊脂組成；

所述不定芽誘導培養基由B5或N6或MS或WPM培養基、0.9~2.1mg/L 6-BA和0.3~0.7 mg/L NAA組成；

所述生根壯苗培養基由1/2 WPM或1/2 MS或1/2花寶培養基、20~30 g/L蔗糖、6.5~8 g/L瓊脂和0.1~0.5mg/L IAA組成。

2.如權利要求1所述的組合培養基，其特征在于，所述預處理培養基、愈傷組織誘導培養基、增殖培養基、不定芽誘導培養基和生根壯苗培養基的pH值為5.6~6.0。

3.一種多肉丸葉海豹組培方法，其特征在于，采用權利要求1或2所述組合培養基進行組培，包括以下步驟：

（1）將無菌外植體接到所述預處理培養基上培養，得到預培養外植體；

（2）將預培養外植體切塊后，接種到所述愈傷組織誘導培養基上培養，得到愈傷組織；

（3）將愈傷組織接種到所述增殖培養基上培養，得到增殖愈傷組織；

（4）將增殖愈傷組織種到所述不定芽誘導培養基上培養，得到不定芽；

（5）將不定芽接種到所述生根壯苗培養基上培養，得到組培苗。

4.如權利要求3所述的組培方法，其特征在于，步驟（1）所述培養為暗培養；培養的時間為24~48 h；培養的溫度為21~25℃。

5.如權利要求3所述的組培方法，其特征在于，步驟（2）所述切塊的厚度為2~3mm；

所述培養時間為56~63天；

所述培養的條件為溫度21~25℃、光照12 ~16 h/d和光照強度為1 500~2 500 lx。

6.如權利要求3所述的組培方法，其特征在于，步驟（3）所述培養時間為56~63天；所述培養的溫度為23~25℃、濕度為60~80%。

7.如權利要求3所述的組培方法，其特征在于，步驟（4）所述培養的時間為49~56天；所述培養條件為溫度21~25℃、光照12~16 h/d和光照強度為1500~2500 lx。

8.如權利要求3所述的組培方法，其特征在于，步驟（5）所述不定芽的大小為0.5~1 cm；

所述組培苗的大小為1.5~2 cm。

9.一種多肉丸葉海豹的栽培方法，其特征在于，包括以下步驟：采用權利要求3~8任一項所述組培方法處理無菌外植體，得到組培苗；將所述組培苗去掉根部，得到無根組培苗；將所述無根組培苗移栽至基質上培養，得到生根的多肉丸葉海豹苗。

10.如權利要求9所述的栽培方法，其特征在于，所述移栽前還包括馴化無根組培苗；

所述馴化的時間為2~5天；

所述基質包括以下體積份的組分：1~2份珍珠巖、2~4份沙礫和1~2份泥炭土；

所述基質的濕度為30~40%；

所述培養的溫度為15~25℃。