[發明專利]特異性檢測BRAF基因突變的抗體及其在制備癌癥檢測試劑盒中的用途

有效

• 申請號: 202010399617.0
• 申請日: 2020-05-13
• 公開（公告）號: CN111285935B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 劉歡;侯冬雪
• 申請（專利權）人: 方達醫藥技術（上海）有限公司
• 主分類號: C07K16/32
• 分類號: C07K16/32;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 上海浙晟知識產權代理事務所(普通合伙) 31345
• 代理人: 楊小雙

1.一種特異性結合BRAF V600E蛋白的單克隆抗體，其中所述抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一種檢測試劑盒，含有權利要求1所述的單克隆抗體。

3.權利要求1所述的單克隆抗體在制備用于檢測BRAF基因V600E突變的癌細胞的試劑盒中的用途。

4.一種免疫磁珠，其特征在于將權利要求1的單克隆抗體采用磁珠進行偶聯。

5.如權利要求4所述的免疫磁珠，其制備方法為：1)羧基磁珠的活化：將羧基磁珠與MES溶液混合，磁分離后靜置，棄上清，重懸于MES溶液中，超聲后磁分離，棄上清，洗滌后重懸于MES溶液中，然后再按照羧基磁珠與EDC溶液的質量比為5:5加入EDC溶液進行活化，獲得活化的羧基磁珠；

2)抗體的偶聯：將步驟1)獲得的活化的羧基磁珠磁分離后，重懸于MEST溶液中，按照羧基磁珠與BRAF V600E蛋白的單克隆抗體溶液的質量比為1: 2進行共價偶聯，然后用PBST溶液洗滌后重懸于PBS溶液中，獲得免疫磁珠；所述共價偶聯在含有0.05％(v/v)Tween-20的且pH為6的MES溶液中進行。

6.權利要求4或5所述的免疫磁珠在制備用于檢測BRAF基因V600E突變的癌細胞的試劑盒中的用途。