[發(fā)明專利]高效液相色譜法測定L-纈氨酸原料中其他氨基酸的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010364918.X | 申請日： | 2020-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN111505151B | 公開（公告）日： | 2022-09-02 |
| 發(fā)明（設計）人： | 王成;張國龍;李芹元;王孟華;曾憲亮 | 申請（專利權）人： | 宜昌三峽普諾丁生物制藥有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/54 |
| 代理公司： | 宜昌市三峽專利事務所 42103 | 代理人： | 成鋼 |
| 地址： | 443000 湖北省*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 高效 色譜 測定 纈氨酸 原料 其他 氨基酸 方法 | ||
1.高效液相色譜法測定L-纈氨酸原料中其他氨基酸的方法，所述的其他氨基酸為L-正纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸，其特征在于，包括如下步驟：
（1）制備對照品溶液：稱取L-正纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸分別置于不同量瓶中，用流動相溶解、定容、搖勻；
（2）制備供試品溶液：稱取L-纈氨酸原料用流動相溶解、定容、搖勻；
（3）高效液相色譜法測定：分別取對照品溶液注入高效液相色譜儀，記錄保留時間和峰面積；取供試品溶液注入高效液相色譜儀，供試品色譜圖中出峰時間及峰形與對照品溶液色譜圖中L-正纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸的出峰時間及峰形進行比對，判定供試品溶液是否含有L-正纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸，將供試品色譜圖中L-正纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸峰面積與對照溶液相應氨基酸峰面積對比，計算出L-纈氨酸原料中各氨基酸的含量；
色譜條件如下：
色譜柱: 氨丙基鍵合硅膠色譜柱，250mm×4.6mm，5μm；
流動相：體積比為72：28的乙腈與磷酸鹽緩沖液的混合溶液，其中磷酸鹽緩沖液濃度為15mmol/L，加入0.2%的三乙胺，用磷酸調(diào)節(jié)pH為6.2；
流速：1.0ml/min；
柱溫：25℃；
進樣體積：20μl；
檢測波長：UV210nm。
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