[發明專利]一種防治冠狀病毒感染的細胞組合及其應用

在審

• 申請號: 202010364718.4
• 申請日: 2020-04-30
• 公開（公告）號: CN111450244A
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發明（設計）人: 張歡;程鏵
• 申請（專利權）人: 北京翊博普惠生物科技發展有限公司
• 主分類號: A61K39/215
• 分類號: A61K39/215;A61P31/14;C12N5/10;C12N15/867;C12N5/0783;C12N15/50
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;周達

本發明提供了一種防治冠狀病毒感染的細胞組合及其應用。具體而言，本發明提供了DC細胞和/或NP蛋白在制備用于預防和/或治療冠狀病毒感染的免疫細胞組合物和/或試劑盒中的應用，還提供了一種負載NP抗原的DC細胞，還提供了負載NP抗原的DC細胞誘導產生的CTL細胞和NK細胞。本發明用DC細胞進行預防和治療新冠病毒感染以及以DC誘導的T細胞和NK細胞進行治療新冠病毒感染。

技術領域

本發明是關于一種防治(預防和/或治療)冠狀病毒感染的技術，具體而言，是關于一種防治冠狀病毒感染的細胞、包含所述細胞的組合物及其制備方法和相關應用。

背景技術

新型冠狀病毒(或稱COVID-19或SARS-CoV-2)與肺上皮細胞上的CEA2蛋白結合后侵染該細胞，造成肺部炎癥，嚴重的可引發呼吸衰竭，進而死亡。

越來越多的研究表明新型冠狀病毒除了人類，還可以貓、狗等動物作為宿主，可引起更大范圍的傳播。同時，新型冠狀病毒被發現存在于自來水和空氣中，這為該病毒的防控帶來更大的麻煩。

總體來說，防治新型冠狀病毒的藥物開發思路有兩種，一是阻止病毒和宿主細胞結合，二是阻止新冠病毒在宿主細胞內的產生。如果要阻止病毒和宿主細胞結合，作用的靶點應是病毒的刺突蛋白Spike或者宿主細胞上的ACE2受體。據悉，全球現有60個以上的新冠疫苗項目，涉及超100家生物企業和機構。研發產品包含核酸類疫苗、蛋白類疫苗、病毒載體疫苗以及減毒疫苗等，主要機制就是通過暴露病毒 Spike蛋白給機體免疫系統，誘導B細胞產生中和抗體進而阻斷病毒的侵襲。但Spike 蛋白糖基化以及易突變的特點使得中和抗體難以在體內形成長期免疫保護。同時，對于已經潛入細胞內的病毒顆粒，或者已發生變異的病毒顆粒，中和抗體將無法發揮作用。如果要阻止新病毒的產生，作用的靶點則是RNA依賴性RNA聚合酶(RdRp)或者蛋白質水解酶，現正在進行臨床試驗的瑞德西韋、克力芝等藥物則是基于上述作用靶點。但需知道，這類藥物主要是抑制病毒的復制，降低病毒的滴度，但能否徹底清除細胞內的病毒或發生變異的病毒，則是當前藥物研發需要關注的問題，否則，在機體免疫系統功能較差時，殘余病毒極有可能卷土重來。

發明內容

本發明的一個目的在于提供一種預防和/或治療冠狀病毒感染的新技術。

本發明提出以COVID-19病毒核衣殼蛋白(nucleoprotein，NP)作為靶點，應用細胞免疫的方式進行預防和/或治療冠狀病毒感染。

COVID-19病毒NP蛋白具有如SEQ ID No.2所示氨基酸序列。

本發明中以NP作為靶點，一方面，NP蛋白特異性的T細胞不會因為病毒的變異而丟失掉作用靶點；另一方面，NP蛋白特異性的T細胞不僅可以殺死新冠病毒感染的細胞，對于和其結構蛋白有高度相似性的SARS病毒或其它未被識別的結構相似病毒，也能發揮很好的清除作用，在治療當前感染病毒的同時，還可以預防未來可能出現的一些病毒感染疾病。更重要的是，以往的抗原選擇，多屬于計算預測獲取的幾個抗原肽分子的聯合應用，具有抗原的不確定性等問題。本發明將完整的NP蛋白通過天然的免疫反應呈遞方式進行處理，由此獲取多個與HLA相匹配的短肽，進而介導特異性T細胞的激活和抗病毒作用。

根據本發明的具體實施方案，本發明提供的預防和/或治療冠狀病毒感染的技術，以DC細胞負載新冠病毒NP抗原制備DC疫苗預防冠狀病毒感染，通過注射負載NP 抗原的DC細胞至健康人體內，使患者自發產生抗病毒免疫反應，體內誘導病毒特異性T細胞和NK細胞的產生。本發明的負載NP蛋白的DC細胞能夠同時誘導擴增 NP特異性T細胞(CTL細胞)和NK細胞，通過注射所述的CTL細胞和NK細胞的組合，可迅速改善患者體內的免疫狀況，減少非特異性炎癥反應，清除病毒感染細胞。

從而，一方面，本發明提供了DC細胞和/或NP蛋白在制備用于預防和/或治療冠狀病毒感染的免疫細胞組合物和/或試劑盒中的應用。所述的免疫細胞組合物可作為或進一步制備藥物或疫苗。