[發(fā)明專利]鐵皮石斛DcCSLA8基因及其在促進(jìn)植物多糖的合成中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010362294.8
• 申請(qǐng)日: 2020-04-30
• 公開（公告）號(hào): CN111500604A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳東紅;高雅倩;劉京晶;斯金平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/54
• 分類號(hào): C12N15/54;C12N15/82;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/82
• 代理公司: 北京智為時(shí)代知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

本發(fā)明公開了一種鐵皮石斛DcCSLA8基因，所述基因的序列如下:(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或(b)與SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性的核苷酸序列。本發(fā)明還提供了鐵皮石斛DcCSLA8基因在促進(jìn)植物多糖的合成中的應(yīng)用。通過在植物中提高鐵皮石斛DcCSLA8基因，可促進(jìn)植物多糖的合成。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及鐵皮石斛DcCSLA8基因及其在促進(jìn)植物多糖的合成中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

鐵皮石斛(Dendrobium catenatum)為蘭科石斛屬多年生草本植物，以莖入藥，具有滋陰清熱、益胃生津等功效。葡甘聚糖是鐵皮石斛莖中主要的活性多糖，對(duì)提高免疫、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖、改善記憶衰退等方面具有重要作用。

在多種植物中，類纖維合成酶A(cellulose synthase like A，CSLA)基因參與1，4-β-葡甘聚糖的生物合成，是調(diào)控植物體內(nèi)葡甘聚糖骨架合成的關(guān)鍵酶基因。例如，在擬南芥中，CSLA2、CSLA3以及CSLA9共同調(diào)控莖中葡甘聚糖的生物合成，CSLA7參與胚胎中葡甘聚糖的生物合成；在魔芋曲霉中AkCSLA3具有葡甘露糖甘露糖基和葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶活性；楊樹CSLA1編碼葡甘聚糖合成酶。

在鐵皮石斛中，已報(bào)道有到8個(gè)DcCSLA基因，大部分CSLA基因在莖中表達(dá)量高于葉片和根部，其中DcCSLA6基因?qū)Ω事短堑暮铣捎写龠M(jìn)作用，而其他DcCSLA基因的功能未見報(bào)道。因此，克隆DcCSLA8基因，構(gòu)建過表達(dá)載體，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株多糖含量進(jìn)行測(cè)定與分析，可探討研究鐵皮石斛DcCSLA8基因的功能。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的揭曉鐵皮石斛DcCSLA8基因的功能應(yīng)用，并提供鐵皮石斛DcCSLA8基因及其在促進(jìn)植物多糖合成中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種鐵皮石斛DcCSLA8基因，所述基因的序列如下:

(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或

(b)與SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性的核苷酸序列。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述鐵皮石斛DcCSLA8基因的序列為SEQ ID NO：1。

本發(fā)明還提供了上述基因的重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述重組菌為將上述基因插入表達(dá)載體得到的重組菌。

本發(fā)明還提供了一種鐵皮石斛DcCSLA8基因在促進(jìn)植物多糖的合成中的應(yīng)用，所述基因的序列如下:

(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或

(b)與SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性的核苷酸序列。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述鐵皮石斛DcCSLA8基因的序列為SEQ ID NO：1。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述植物為擬南芥或煙草。優(yōu)選情況下，所述植物為擬南芥。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述應(yīng)用還包括：將包含鐵皮石斛DcCSLA8基因連接到載體上，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化到擬南芥、篩選、培養(yǎng)和獲得轉(zhuǎn)基因株系。