[發(fā)明專利]一種采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卡馬西平血液藥物濃度的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010325793.X
• 申請(qǐng)日: 2020-04-23
• 公開（公告）號(hào): CN111537632A
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盛蔚;丁沛瑜;王金玉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州藥明澤康生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 上海浦一知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權(quán)

本發(fā)明涉及一種采用液相色譜?質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卡馬西平血液藥物濃度的方法，具體步驟包括卡馬西平儲(chǔ)備液的配制、校準(zhǔn)品溶液的制備、質(zhì)控品溶液的制備、待測(cè)樣品的前處理、液相色譜?質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)參數(shù)的設(shè)置后將處理后的待測(cè)血清樣本按進(jìn)樣2μL進(jìn)行液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析，最后計(jì)算血清樣本中卡馬西平濃度。本發(fā)明中的標(biāo)準(zhǔn)品溶液和質(zhì)控品溶液的基質(zhì)使用動(dòng)物血清代替人血清，降低了檢測(cè)成本，且本發(fā)明中檢測(cè)血清中卡馬西平濃度的方法，準(zhǔn)確、快速、特異性強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卡馬西平血液藥物濃度的方法，屬于分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

卡馬西平(Carbamazepine)是一種高效的廣譜抗癲癇藥物，能夠?qū)Χ喾N癲癇如部分性發(fā)作、復(fù)雜部分性發(fā)作、簡單部分性發(fā)作、繼發(fā)性全身發(fā)作、全身性發(fā)作和強(qiáng)直-陣攣發(fā)作等癥狀具有療效，同時(shí)對(duì)神經(jīng)性疼痛、心律失常、預(yù)防及治療躁狂抑郁癥都有一定治療作用。

卡馬西平的血藥濃度與用藥劑量、臨床療效和副作用有直接的關(guān)系?？R西平推薦的血漿濃度5到10微克/毫升。過量服用可能造成劇烈眩暈、嗜睡、呼吸不規(guī)則、顫抖，心跳異常、昏迷，嚴(yán)重時(shí)有致命的皮膚反應(yīng)，包括中毒性表皮壞死松解癥和史蒂文斯-約翰遜綜合征等都在卡馬西平治療中有所報(bào)告。所以臨床用藥時(shí)需要對(duì)個(gè)體隨時(shí)進(jìn)行監(jiān)測(cè)給藥。

另外，卡馬西平的代謝效率隨個(gè)體的生理情況不同而不同?？R西平血藥濃度的檢測(cè)結(jié)果可以作為個(gè)性化治療方案的制定依據(jù)。

治療藥物監(jiān)測(cè)(therapeutic drug monitoring,簡稱TDM)是指在臨床進(jìn)行藥物治療過程中，觀察藥物療效的同時(shí)，定時(shí)采集患者的血液(有時(shí)采集尿液、唾液等液體)，測(cè)定其中的藥物濃度，探討藥物的體內(nèi)過程，以便根據(jù)患者的具體情況，以藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，借助先進(jìn)的分析技術(shù)手段，并利用藥代動(dòng)力學(xué)原理和公式，使給藥方案?jìng)€(gè)體化，從而達(dá)到滿意的療效及避免發(fā)生毒副反應(yīng)，同時(shí)也可以為藥物過量中毒的診斷和處理提供有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，將臨床用藥從傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)?zāi)Ｊ教岣叩奖容^科學(xué)的水平。

現(xiàn)有的血藥濃度監(jiān)測(cè)試劑盒中的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品基質(zhì)都為同源基質(zhì)(即人血來源的全血、血清或血漿樣本)。但人血的采集在世界范圍內(nèi)都是嚴(yán)格受控的，要經(jīng)過嚴(yán)格的前期志愿者的招募、體檢篩選；要符合倫理要求；要進(jìn)行血液傳染性病毒安全性檢測(cè)。而且，《中華人民共和國獻(xiàn)血法》第十一條規(guī)定，“無償獻(xiàn)血的血液必須用于臨床，不得買賣?！币陨显蛟斐蔁o論TDM試劑盒生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)室自建方法TDM檢測(cè)，獲得國內(nèi)人源基質(zhì)都比較困難。而若從國外進(jìn)口校準(zhǔn)品、質(zhì)控品成品，成本高、周期長，限制了TDM在國內(nèi)的開展。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有馬西平血液藥物濃度檢測(cè)過程中校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基質(zhì)需要采用人源基質(zhì)造成的檢測(cè)受限的問題，提出了一種LC-MS法進(jìn)行卡馬西平TDM檢測(cè)時(shí)使用動(dòng)物血清替代人血清作為基質(zhì)的檢測(cè)方法。

本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：一種采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卡馬西平血液藥物濃度的方法，具體步驟包括如下：

(1)卡馬西平儲(chǔ)備液的制備：取一定量的卡馬西平，加甲醇溶解，制備得到卡馬西平儲(chǔ)備液；

(2)內(nèi)標(biāo)工作液：取一定量的D10-卡馬西平，加80％甲醇溶解，制備得到內(nèi)標(biāo)工作液；

(3)取一定量的動(dòng)物血清低溫解凍，再平衡至室溫備用；

(4)校準(zhǔn)品溶液的制備：

取步驟(3)的動(dòng)物血清加入一定量的卡馬西平儲(chǔ)備液，制備得到一定梯度濃度的多個(gè)卡馬西平校準(zhǔn)品溶液；

(5)質(zhì)控品溶液的制備：

取步驟(3)的動(dòng)物血清加入一定量的卡馬西平儲(chǔ)備液，制備得到一定梯度濃度的多個(gè)卡馬西平質(zhì)控品溶液；

(6)待測(cè)樣品的前處理：