[發明專利]一種熊膽汁的檢測方法

在審

• 申請號: 202010319083.6
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111458449A
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發明（設計）人: 郭光鵬;岳小青;孔令祿;王繼新;曾海蓉;甘青霞;張曉瑞
• 申請（專利權）人: 四川利民中藥飲片有限責任公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N9/04;G01N21/78;G01N21/84
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種熊膽汁的檢測方法，其特征在于：它是采用薄層色譜法檢測，步驟如下：

(1)制備供試品溶液：取熊膽汁，加緩沖鹽溶液溶解，過濾，取續濾液作為供試品溶液；

(2)對照品溶液：取熊膽粉、牛膽粉、羊膽粉和豬膽粉對照藥材，分別加乙醇溶解，得對照品溶液；

(3)薄層色譜檢測：將供試品溶液和對照品溶液在薄層板上點樣，以異戊醇-冰醋酸-水為展開劑展開，顯色，檢視，對比即可。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(1)中，所述熊膽汁與緩沖鹽溶液的質量體積比為0.1-0.3g:2mL，優選0.2g:2mL；所述緩沖鹽溶液為含磷酸二氫鈉和庚烷磺酸鈉的甲醇水溶液，其中，磷酸二氫鈉、庚烷磺酸鈉、甲醇和水的質量體積比為3～6g:1～3g:600mL：400mL，優選4.68g:2g：600mL:400mL。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(2)中，所述對照品溶液中每1mL含各對照藥材3～8mg，優選5mg。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(3)中，所述異戊醇-冰醋酸-水的體積比為16～20:4～6:2～4，優選18:5:3；所述顯色的方法為：

取展開后的薄層板，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，再加熱至斑點顯色清晰。

5.根據權利要求1或4所述的檢測方法，其特征在于：所述薄層板為硅膠G薄層板。

6.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于：所述硫酸乙醇溶液濃度為8％～12％，優選10％；所述加熱溫度為100～110℃，優選105℃。

7.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(3)中，所述檢視的色譜圖中，供試品在熊膽粉對照藥材色譜相同位置上，顯相同顏色的熒光斑點，在牛膽粉、羊膽粉和豬膽粉對照藥材色譜相同位置上，不顯相同顏色的熒光主斑點，即為熊膽汁。

8.一種熊膽汁的檢測方法，其特征在于：它包括如下步驟：

a、按照權利要求1～7的方法檢測；

b、取熊膽汁，按照比重瓶法測定相對密度；用pH計測定pH值；

c、取熊膽汁，加水混勻，用苯酚-硫酸法定性測定糖；用顯微鏡觀察異性有機物。

9.根據權利要求8所述的檢測方法，其特征在于：步驟c所述苯酚-硫酸法定性測定糖的方法為：熊膽汁加10倍量v/v水，2～5滴1g/50mL的α-萘酚乙醇溶液，混勻，60℃水浴加熱5min，再加入2.5倍量v/v的硫酸顯色；所述顯微鏡觀察方法為：熊膽汁加20倍量水，離心或過濾，取不溶物在顯微鏡下觀察。

10.根據權利要求8～9任意一項所述的檢測方法，其特征在于：所述熊膽汁在熊膽粉對照藥材色譜相同位置上，顯相同顏色的熒光斑點，在牛膽粉、羊膽粉和豬膽粉對照藥材色譜相同位置上，不顯相同顏色的熒光主斑點；相對密度不低于1.01；pH值為7.0～8.0；苯酚-硫酸法測定時液面交接處不顯紫色環；顯微鏡觀察無植物組織、動物組織或淀粉。