[發(fā)明專(zhuān)利]一種超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中16種真菌毒素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010250908.3
• 申請(qǐng)日: 2020-04-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111366652A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉文靜;傅建煒;黃彪;韋航
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 福州旭辰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 35233
• 代理人: 楊清雅

1.一種超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中16種真菌毒素的方法，其特征在于，包括制備供試樣品和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定；

其中，制備供試樣品所用提取液為水按體積比3:1~1:3與體積比為1:5~1:10的甲酸/乙腈，后加入QuEChERS提取鹽包；

制備供試樣品提取液采用dSPE凈化管和Oasis PRIME HLB小柱進(jìn)行凈化；

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法中色譜條件中流動(dòng)項(xiàng)A為5 ~10mmol·L^-1乙酸銨水溶液+體積比0.1%~1%甲酸水溶液；流動(dòng)相B：乙腈；質(zhì)譜條件中，質(zhì)譜分析的離子源除玉米赤霉烯酮及內(nèi)標(biāo)是電噴霧負(fù)離子源ESI^-，其余毒素均為電噴霧正離子源ESI⁺，檢測(cè)方式：多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)MRM模式，毛細(xì)管電壓：1.5 kV；錐孔氣流：氮?dú)猓魉?0 L·h^-1；離子源溫度：120 ℃；脫溶劑氣溶劑氣溫度：500 ℃，流量為1000 L/hr；碰撞氣：高純氬氣；

所檢測(cè)的16種真菌毒素為：黃曲霉毒素B₁、黃曲霉毒素B₂、黃曲霉毒素G₁、黃曲霉毒素G₂、玉米赤霉烯酮、桔青毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、鐮刀菌烯酮、雪腐鐮刀菌烯醇、赭曲霉毒素、T-2毒素、HT-2毒素、雜色曲霉毒素、伏馬毒素B₁、伏馬毒素B₂、伏馬毒素B₃。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中16種真菌毒素的方法，其特征在于：制備供試樣品包括如下步驟：

樣品處理：取粉碎的待測(cè)茶葉0.5g，茶葉樣品加入10ml水和10ml體積比1:5~1:10的甲酸/乙腈溶液按混合后，置于自動(dòng)振蕩器中振搖10 min；加入QuEChERS 提取鹽包，振搖1min，4000r/min離心5 min，后取出上清液進(jìn)行凈化；

凈化：安裝HLB小柱，不執(zhí)行小柱活化步驟，取約0.4 mL上清液通過(guò)HLB小柱，棄去濾液，然后再取1 mL上清液，再次通過(guò)小柱并收集濾液，將濾液移到含有混合吸附劑的dSPE凈化管中，在10000 r/min\下離心10 min，上清液過(guò)0.22 μm濾膜；吸取190 μL于300 μL內(nèi)插管中，加入10 μL穩(wěn)定同位素混合溶液，渦旋混勻，待進(jìn)樣。