[發(fā)明專利]蔬菜樣品前處理及同時檢測其中多種雙酚類化合物的方法

在審

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• 申請日: 2020-03-27
• 公開（公告）號: CN111380984A
• 公開（公告）日: 2020-07-07
• 發(fā)明（設計）人: 李菊英;張待娣
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 深圳國海智峰知識產權代理事務所(普通合伙) 44489
• 代理人: 王慶海;劉軍鋒

本發(fā)明涉及一種蔬菜前處理方法及后續(xù)檢測其中多種雙酚類化合物的方法，通過優(yōu)化蔬菜前處理方法和液質聯用檢測方法，實現通過一次前處理過程來同時檢測蔬菜的16種雙酚類化合物中的一種或多種，且采用等梯度洗脫，檢測時間短、靈敏度高、效率高，重現性好。

技術領域

本發(fā)明涉及檢測領域，尤其涉及一種蔬菜樣品前處理及同時檢測其中多種雙酚類化合物的方法。

背景技術

雙酚類化合物屬于環(huán)境內分泌干擾物，可與人體內的多種核受體結合，即使在低濃度水平下仍會干擾人體和動物等生物體的內分泌系統，影響其生殖和發(fā)育。由于消費者的關注以及國家的禁令，制造商已開始從其產品中去除BPA并逐漸轉向使用其他雙酚化合物(如BPS、BPF、BPAF等)。同時，已有研究表明，與BPA相比，這些BPA替代品具有與BPA相似的雌激素活性和潛在的毒性，如若被暴露于人類生活環(huán)境之中，其造成的相關效應也值得關注。雙酚類化合物主要暴露途徑是通過攝入(食物或灰塵)、吸入(空氣或顆粒)和皮膚吸收(紙制品、灰塵或PCP)進入人體，雖然科學家通過體內和體外實驗發(fā)現了BPs的一些毒性，但迄今為止除了BPA外，其他的BPs還沒有用于人體暴露的估計每日暴露劑量或口服最大允許劑量的規(guī)定。此外，廣泛的環(huán)境調查研究發(fā)現這類物質在環(huán)境和食品基質中污染較為嚴重，甚至會從環(huán)境基質遷移至食品中，并通過食物鏈進入人體。膳食攝入被認為是人類最主要的化學污染物暴露途徑之一，其中蔬菜在全世界居民的膳食組成中一直占有舉足輕重的地位。為了研究其他多種雙酚類化合物通過蔬菜攝入進入人體對其所造成的影響，為雙酚類化合物的安全性評價提供科學數據，首要任務就是精確定量蔬菜中的BPs類物質。

樣品分析方法的建立主要包括：采樣、提取、凈化和上機檢測。食品基質由于成分復雜、種類多樣，如果樣品不經過有效的凈化而直接上機檢測會產生嚴重的基質抑制，降低檢測方法的靈敏度，同時會對儀器造成損害。因此，對于食品基質，有效的前處理方法十分重要。前處理主要是指提取和凈化步驟。對于食品基質常用的提取方法有液液萃取、加速溶劑萃取、凝膠參透色譜(GPC)、基質固相分散萃取以及固相萃取。液液萃取由于具有非選擇性，對目標物提取的同時會產生很多共萃物，對于復雜食品的處理效果不佳。加速溶劑萃取技術由于具有良好的提取效率，多形態(tài)的提取方式，在一些較難萃取的基質中應用較多。但加速溶劑萃取步驟較為繁瑣，時間消耗長，不適合做大批量樣品。凝膠色譜技術由于對大分子干擾物(油脂、蛋白、色素)具有良好的去除效果，因此在高油脂、多色素食品中應用較多。但凝膠色譜技術的缺點是有機溶劑消耗過大，對環(huán)境容易造成污染。固相萃取技術由于兼具提取和良好的凈化作用，并且有機溶劑消耗少，因而被廣泛應用于食品基質中雙酚類物質的前處理。

目前雙酚類化合物檢測方法主要有氣相色譜質譜聯用(GC-MS/MS)、液相色譜以及液相色譜質譜聯用(LC-MS/MS)。然而，由于GC-MS檢測前往往需要復雜的衍生化前處理，導致其應用受到限制。相比于GC-MS/MS，LC-MS/MS技術在食品中這類化合物的檢測運用的更多。

余建龍在《七種雙酚類化合物雌激素活性評價及其在食品中檢測方法的建立和應用[D]》中利用乙腈超聲提取，HLB固相萃取柱和串聯Sep-Pak NH2富集凈化，超高效液相色譜質譜檢測，建立了谷物類食品中5種雙酚類化合物的檢測方法。該方法具有較高靈敏度和穩(wěn)定回收率，適用于痕量檢測要求，并將此方法成功應用于北京市售12份谷物類食品中的檢測。由于蔬菜食品具有高水分和高濃度色素等特點，簡單的溶劑萃取很難使樣品凈化和有效富集。目前關于蔬菜類食品中雙酚類化合物的檢測方法還未見有報道。

發(fā)明內容