[發(fā)明專利]基于脂多糖的礦化普魯士藍光免疫制劑的合成方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010203820.6
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN111388670A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭斌;王樹超;明東;劉爽;甘霖
• 申請（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K49/12;A61K39/00;A61K47/36;A61P35/00;C01G49/10;C01C3/12
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 程小艷

本發(fā)明涉及一種基于脂多糖的礦化普魯士藍光免疫制劑的合成方法。步驟包括：1)稱配置濃度為1.0mM六水合三氯化鐵水溶液、1.0mM亞鐵氰化鉀水溶液。2))利用常溫仿生合成普魯士藍光免疫劑(LPS@PB)納米顆粒。LPS可以高效激活M1型巨噬細(xì)胞,進而誘導(dǎo)大量的炎癥因子來活化全身免疫系統(tǒng)，引起免疫應(yīng)答；普魯士藍納米顆粒引導(dǎo)的MRI成像引導(dǎo)實現(xiàn)了腫瘤抗原光控釋放，進一步增強了ICD效應(yīng)，高效殺傷腫瘤。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及普魯士藍光免疫制劑的制備領(lǐng)域,具體涉及一種基于脂多糖仿生合成普魯士藍光免疫劑的合成方法。

背景技術(shù)

惡性腫瘤(癌癥)已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一，根據(jù)最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，近十幾年來惡性腫瘤的發(fā)病率呈持續(xù)上升態(tài)勢，其防控形勢日益嚴(yán)峻。為此開發(fā)成本低、效果好的應(yīng)對措施已刻不容緩。

最近，腫瘤免疫治療已經(jīng)新的腫瘤治療方向，其指應(yīng)用免疫學(xué)原理和方法，提高腫瘤細(xì)胞的免疫原性和對效應(yīng)細(xì)胞殺傷的敏感性，激發(fā)和增強機體抗腫瘤免疫應(yīng)答，并將免疫細(xì)胞或效應(yīng)分子輸入患者體內(nèi)，協(xié)同機體免疫系統(tǒng)殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長的療法，對人體的副作用小。而LPS是一種脂質(zhì)和多糖的復(fù)合物,為革蘭氏陰性細(xì)菌外璧層中特有的一種化學(xué)成分，分子量大于10000。其由核心多糖、O-多糖側(cè)鏈、和類脂A組成。當(dāng)細(xì)胞接受LPS刺激時，LPS通過巨噬細(xì)胞表面的TLR4來活化核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB，發(fā)生經(jīng)典的，從而和細(xì)胞因子的表達，包括TNT-α、IL-6和IL-1α等產(chǎn)生炎癥，并能夠高表達誘生型一氧化氮酶(iNOS)，引發(fā)天然免疫，可以作為腫瘤免疫治療的免疫制劑。

光熱治療(PTT)是一種與光相伴的診斷和治療方法，具有微創(chuàng)、高效、特異性好、時空可控等優(yōu)點，是治療癌癥的一種理想方法。在治療過程中，其可以利用光熱轉(zhuǎn)換在幾分鐘內(nèi)破壞細(xì)胞膜，從而殺死癌細(xì)胞。光熱治療過程產(chǎn)生的副作用較小，全身系統(tǒng)毒性低，不會對正常組織造成損傷，具有很大的臨床應(yīng)用潛力。如果將光熱治療與腫瘤免疫治療相結(jié)合，將極大地增強腫瘤治療的效果，使腫瘤治療更加徹底。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提出一種基于脂多糖仿生合成普魯士藍光免疫劑(LPS@PB)。

基于脂多糖仿生合成普魯士藍光免疫劑(LPS@PB)的合成方法，步驟如下：

1)稱取13.5mg的二水合氯化銅，加入50mL超純水后超聲溶解，得到濃度為1.0-2.0mM的六水合三氯化鐵水溶液。

2)稱取21.1mg的氯化釓六水合物，加入50mL超純水后超聲溶解，得到濃度為1.0-2.0mM的亞鐵氰化鉀水溶液。

3)利用常溫仿生合成LPS@PB納米顆粒的方法如下：

(1)量取20mL六水合三氯化鐵溶液于溫控攪拌臺上，在60℃條件下攪拌加熱

(2)量取20mL亞鐵氰化鉀溶液放于溫控攪拌臺上，在60℃條件下攪拌加熱

(3)10分鐘后，分別向上述溶液中加入2-6mg LPS，反應(yīng)1h；

(4)用移液槍將六水合三氯化鐵與LPS的反應(yīng)溶液加入亞鐵氰化鉀與LPS的反應(yīng)溶液中，反應(yīng)30min；

(5)隨后將體系溫度降至室溫，用乙醇和去離子水洗滌純化三遍，沉淀重溶于去離子水中待用。

制備出的該藥物有有以下幾大優(yōu)點：1)LPS可以高效激活M1型巨噬細(xì)胞,進而誘導(dǎo)大量的炎癥因子來活化全身免疫系統(tǒng)，引起免疫應(yīng)答；2)普魯士藍納米顆粒引導(dǎo)的MRI成像可視化引導(dǎo)實現(xiàn)了腫瘤抗原的光控釋放，進一步增強了ICD效應(yīng)，并誘使機體產(chǎn)生免疫記憶功能,達到高效、徹底治療腫瘤的目的。

具體實施方式

以下對本發(fā)明作進一步的說明。

實施例1：