[發明專利]非壓迫型腰椎間盤髓核突出癥動物模型的建立

在審

• 申請號: 202010202425.6
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN111357711A
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: 陸志東;金群華;陳志榮;劉莉;李鵬;張亮;孫克寧
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學總醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 寧夏合天律師事務所 64103
• 代理人: 郭立寧

一種非壓迫型腰椎間盤突出癥動物模型的建立方法，該方法包括：S1，距大鼠尾根部1厘米處切下鼠尾并縫合傷口，獲取大鼠尾椎椎間盤髓核；S2，切開大鼠尾椎椎間盤纖維環，髓核呈膠凍樣，取5個髓核和50μl生理鹽水充分混合稀釋成混懸液；S3，將20μl髓核混懸液和30μl2%利多卡因注射液注射到腰椎硬膜外腔，使混懸液充斥于神經根周圍。本發明利用大鼠尾巴粗大，含有足量椎間盤組織，其髓核呈膠凍狀的特點，結合硬膜外穿刺技術，將大鼠自體髓核混懸液注射到腰椎硬膜外腔，制造出髓核組織暴露于血循環及機體免疫系統，證實即使位于大鼠腰椎管內的髓核混懸液沒有壓迫神經根，但也會出現神經根功能和形態學的變化，證明了本模型的有效性。

技術領域

本發明屬于動物醫學動物模型建立技術領域，尤其涉及一種非壓迫型腰椎間盤髓核突出癥動物模型的建立。

背景技術

傳統觀點認為突出的腰椎間盤髓核壓迫神經根是引起坐骨神經痛的原因。近年來，隨著人們對腰椎間盤突出癥(LDH)認識研究的不斷深化，發現即使神經根沒有被突出的髓核壓迫，也會出現坐骨神經痛，其發病機理并不清楚。人們希望通過建立一種可靠、有效的非壓迫型腰椎間盤髓核突出動物模型，通過施加干預因素，準確地觀察模型體內產生的變化，探究疾病發生機理，并將研究成果推廣到臨床，為治療腰椎間盤突出癥提供合理、有效的防治手段。因此，建立一種理想的非壓迫型腰椎間盤髓核突出癥動物模型對本病機制研究和臨床防治具有重要意義。

目前，根據腰椎間盤髓核是否壓迫神經根，將腰椎間盤突出癥動物模型分為壓迫型和非壓迫型。壓迫型腰椎間盤突出動物模型成熟，而非壓迫型腰椎間盤突出動物模型很少。國內外的學者針對非壓迫型椎間盤突出的機制特點，已建立了一些動物模型，但這些模型的建立方法比較復雜，對動物損傷大，成功率低，一些模型還存在可重復性差、價格昂貴的缺點。

我們對理想的動物模型要求是①能夠重現椎間盤退行性病變的客觀規律；②模型動物的生理和解剖特點與人類高度的相似性；③動物模型重復性好，可控性高；④周期短、經濟性好、可重復性強、成功率高。

目前常用于腰椎間盤突出癥模型的動物中，猴子等靈長類動物雖然更接近人的解剖生理特點，但是這些動物價格高、對實驗室條件和設備都有特殊要求，而且實驗周期長，不便于大規模采用。而豬、狗大型哺乳動物同樣存在價格高、實驗周期長和實驗場所限制等多方面的缺陷。在各類動物中，Sprague-Dawlay大鼠(又稱SD大鼠)的基因與人類比較接近，其脊柱基本構成也與人相似，如L4、L5神經根是坐骨神經的主要組成成分，并且品系完備，有較強的抗感染力和生命力，經濟易獲得，可大量使用。

中國專利申請“破裂型腰椎間盤突出癥的動物模型的建立方法”，專利申請號CN201710682995.8，揭示了一種破裂型腰椎間盤突出癥的動物模型的建立方法，該發明以模擬后縱韌帶破裂后椎間盤髓核充分接觸血運為切入點，通過人為切去軟骨終板暴露髓核的方法，創造出髓核組織暴露于血循環及機體免疫系統之中的條件，建立一種可以促進突出的椎間盤重吸收的動物模型。采用手術的方法，把大鼠尾部的椎間盤髓核放置到腰部神經根旁邊，做成對神經根的壓迫，手術切口較長，必須切除大鼠的腰椎椎板顯露出神經組織。這個模型的存在的不足之處是：1、髓核對神經根造成壓迫。2、手術創傷大，大鼠死亡率高，有手術本身損傷神經的可能。3、研究的是傳統的腰椎間盤髓核突出壓迫神經根造成的影響。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種操作簡單、成功率高、價格便宜、重復性好、對神經根干擾性小的非壓迫型腰椎間盤髓核突出癥動物模型的建立方法。

為實現上述目的，本發明提出如下技術方案：一種非壓迫型腰椎間盤突出癥的動物模型的建立方法，包括以下步驟：

S1，距大鼠尾根部1厘米處切下鼠尾并縫合傷口，獲取大鼠尾椎椎間盤髓核；

S2，切開大鼠尾椎椎間盤纖維環，髓核呈膠凍樣，取5個髓核和50μl生理鹽水充分混合稀釋成混懸液；