[發(fā)明專利]提供具有嵌合抗原受體(CAR)的個性化細胞的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010196217.X
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111718421A
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: A.博西奧;O.哈特;D.埃卡特;C.赫貝爾
• 申請（專利權(quán)）人: 美天施生物科技有限兩合公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;李志強

1. 提供細胞的方法，所述細胞包含對暴露在腫瘤細胞上的一種或多種靶抗原具有特異性的嵌合抗原受體(CAR)，其特征在于，提供包含腫瘤細胞和非腫瘤細胞的細胞樣品并重復(fù)以下步驟

-使細胞組織與包含熒光部分和抗原識別部分的綴合物接觸

-從細胞組織中去除未結(jié)合的綴合物，并通過由第一綴合物的熒光部分發(fā)射的熒光輻射檢測結(jié)合至所述綴合物的細胞

-消除由所述綴合物的熒光部分發(fā)射的熒光

其中綴合物包含熒光部分和識別不同抗原的抗原識別部分

直到鑒定提供有識別不同抗原的抗原識別部分的至少兩種綴合物為止，其組合允許在腫瘤細胞和非腫瘤細胞之間進行區(qū)分，和

提供具有所鑒定的至少兩個抗原識別部分作為嵌合抗原受體(CAR)的細胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，包含嵌合抗原受體(CAR)的所述細胞選自T細胞、NK細胞或被工程改造為在通過其他細胞的結(jié)合被觸發(fā)時破壞其他細胞的細胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，至少兩個抗原識別部分以“與”型、“或”型或“非”型提供。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項的方法，其特征在于，至少兩個抗原識別部分以銜接子型提供。

5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于，通過提供包含作為嵌合抗原受體(CAR)的抗原識別部分的生物素的細胞，并提供經(jīng)鑒定的至少兩個抗原識別部分與抗生物素部分的綴合物，并將所述綴合物與所述細胞綴合，來向所述細胞提供經(jīng)鑒定的至少兩個抗原識別部分作為嵌合抗原受體(CAR)。

6.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于，通過提供包含作為第一嵌合抗原受體(CAR)的抗原識別部分的生物素和作為第二嵌合抗原受體(CAR)的抗原識別部分的第二表位的細胞，并提供經(jīng)鑒定的至少兩個抗原識別部分與抗生物素部分和第二部分的綴合物，所述抗生物素部分和第二部分將所述綴合物與所述細胞綴合，來向所述細胞提供經(jīng)鑒定的至少兩個抗原識別部分作為嵌合抗原受體(CAR)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的方法，其特征在于，提供有抗原識別部分的至少兩種綴合物結(jié)合至少20%的腫瘤細胞和小于5%的非腫瘤細胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項的方法，其特征在于，提供有抗原識別部分的至少兩種綴合物結(jié)合所述細胞樣品的腫瘤細胞至少是非腫瘤細胞的10倍。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的方法，其特征在于，通過所述綴合物的酶降解來消除由所述熒光部分發(fā)射的熒光輻射。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的方法，其特征在于，通過輻射來消除由所述熒光部分發(fā)射的熒光輻射。

11.通過根據(jù)權(quán)利要求1-10的方法獲得的細胞群。

12.通過根據(jù)權(quán)利要求1-10的方法獲得的藥物組合物。