[發明專利]用于紅斑狼瘡分型的AIM2+CD4+Trm細胞檢測試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 202010194618.1
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111351946B
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發明（設計）人: 陸前進;吳海競;趙志丹;朱歡;李倩文;廖威;趙明
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅二醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

本發明提供了一種用于紅斑狼瘡分型的AIM2supgt;+/supgt;CD4supgt;+/supgt;Trm細胞檢測試劑盒及其應用。AIM2在CD4supgt;+/supgt;Trm細胞中核內的表達量能很好的區分盤狀紅斑狼瘡(DLE)、亞急性皮膚型紅斑狼瘡(SCLE)、系統性紅斑狼瘡(SLE)與健康對照，AIM2supgt;+/supgt;CD4supgt;+/supgt;Trm細胞的占比能夠區分紅斑狼瘡和健康對照。本發明試劑盒運用Opal原位多標記免疫熒光試劑盒及Vectra多光譜成像技術可同時檢測5種識別標記，簡單快捷、經濟實用，便于研究和臨床工作的開展。

技術領域

本發明屬于免疫檢測技術領域，具體涉及用于紅斑狼瘡分型的AIM2⁺CD4⁺Trm細胞檢測試劑盒及其應用。

背景技術

紅斑狼瘡(Lupus?erythematosus,LE)是一組發病與多種因素有關，嚴重者可累及全身多臟器的自身免疫性結締組織疾病。根據患者臨床表現以及病理改變可大致分為盤狀紅斑狼瘡(DLE)、亞急性皮膚型紅斑狼瘡(SCLE)、系統性紅斑狼瘡(SLE)三個亞型。DLE主要侵犯皮膚，是LE中最輕的類型，多數患者皮損無自覺癥狀，但很難完全消退。SCLE臨床上較少見，是一種特殊的中間類型。皮損常反復發作，絕大多數患者均有內臟損害，但嚴重者很少，主要癥狀為關節痛、肌肉痛、反復低熱，少數有腎炎、血液系統改變。系統性紅斑狼瘡是紅斑狼瘡各類型中最為嚴重的一型，其臨床表現多樣，錯綜復雜，可累及多個器官系統，嚴重影響患者生活治療，甚至危及患者生命。由于不同亞型LE患者病情進展存在較大差異，因此早期準確的做出疾病分型對治療方案的選擇、疾病的預后至關重要。但是目前缺少簡便快捷、經濟適用的診斷試劑盒。因此建立有效的臨床適用的試劑盒就顯得尤為重要。有資料顯示，80％以上的LE患者可在發病初始或者進展中出現皮膚受累，因而從皮膚組織出發或可找到一種穩定高效的早期疾病分型標記物。

組織原位型記憶T(Trm)細胞是新近發現的一種記憶T細胞亞型，在皮膚組織中該細胞亞型特異性表達CD69和CD103。Trm細胞產生于特異性免疫反應的克隆收縮階段，并在炎癥消退后長期定植于初次應答區域，不參與血液循環。當機體再次遇到病原體刺激時，可以迅速在組織原位發生反應來清除病原體并釋放趨化因子來招募效應T細胞。已有研究發現Trm細胞參與了多種炎癥和自身免疫性疾病，例如銀屑病、白癜風、腸炎、多發性硬化、自身免疫性肝炎、腎炎及關節炎。另外，在狼瘡腎炎患者的多次腎穿組織樣本中觀察到T細胞克隆成巢狀聚集并持續多年。讓人確信其在紅斑狼瘡的遷延不愈-復發中具有重要意義。我們發現，紅斑狼瘡不同亞型皮膚組織中CD4⁺Trm細胞在空間分布及數量上存在差異。

AIM2是炎癥小體HIN200家族蛋白中的一員。目前認為AIM2有免疫感應和炎性體激活功能。在紅斑狼瘡的相關研究中，通過對比分析SLE患者與正常人皮損中CD4⁺Trm細胞差異基因表達譜，我們首次發現AIM2在狼瘡患者皮損部位CD4⁺Trm細胞中的表達明顯高于正常人，且不同紅斑狼瘡亞型皮膚組織間AIM2⁺CD4⁺Trm分布規律及細胞數存在差異，利用人皮膚CD4⁺Trm細胞中AIM2分子標記物作為輔助能夠很好的區分及鑒別診斷盤狀紅斑狼瘡、系統性紅斑狼瘡與健康對照。而且不同亞型中CD4⁺Trm細胞的AIM2含量也有差異。