[發明專利]一種五倍子單寧制備新工藝

有效

• 申請號: 202010193811.3
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111500655B
• 公開（公告）日: 2021-03-05
• 發明（設計）人: 喬富強;金忠輝;李冬青;喬琳;王輝;焦春昱;李志敏
• 申請（專利權）人: 北京北農科技有限公司;北京農學院
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;C12N1/20;C12R1/25
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 巴曉艷

本發明為一種以五倍子為原料制備五倍子單寧的新工藝，本工藝將內生植物乳桿菌應用于五倍子單寧制備，利用植物乳桿菌的發酵代謝，不僅使得發酵液中五倍子單寧的含量提高了10%左右，也使得五倍子中五倍子單寧提取更徹底，有效的提高了五倍子單寧得率。發酵液經離心得到的上清液，通過AB?8大孔樹脂吸附純化處理，收取其中80%乙醇洗脫部位，可一步制得90%以上含量的五倍子單寧。

技術領域：本發明涉及一種五倍子單寧的制備新工藝。特別涉及一種利用內生植物乳桿菌發酵培養，提高提取液中五倍子單寧的含量，并通過大孔吸附樹脂進一步純化的制備工藝。

背景技術：

五倍子是癭綿蟲科的蚜蟲寄生于漆樹科鹽膚木屬植物葉子上形成的一種蟲癭，是倍蚜干母在鹽膚木葉，上寄生并繁殖的產物。其主要成分為鞣質，含量高達70%以上。具有斂肺、澀腸、止血、解毒之功效，為常用的中藥材。五倍子單寧在醫藥、化工、食品等方面有著廣泛的用途。

鞣質又稱單寧，是廣泛存在于植物界的一類結構比較復雜的多酚類化合物，鞣質按化學結構可分為水解鞣質、縮合鞣質及復合鞣質。鞣質的藥理活性具有獨特性和多樣性，是多種傳統草藥和藥方中的活性成分。其抗突變作用，抗腫瘤作用，抗菌作用，抗氧化作用及在抗病毒、降血脂、降血糖、抗炎、抗血栓、調節免疫方面的作用，越來越引起眾多領域的重視，近年來五倍子單寧已成為國內外的研究熱點。

目前，單寧的主要制備方法有超臨界二氧化碳萃取法、水提法、超聲輔助法以及有機溶劑提取法。這些方法中,超臨界萃取臨界溫度低,能較好地保證有效成分不發生變化，特別適用于那些熱敏感性強、容易氧化分解破壞的成分，但是該方法對設備要求高，價格貴，運行成本也高，實際生產中很難規模化；水提法雖節省能源且操作方便,但由于五倍子中含有水溶性的樹脂、蛋白質、淀粉,經水浸泡后發軟易爛，高溫時更甚,所以直接用水提取所獲得的單寧含量低；超聲波提取技術雖然可以提高其提取效率，但是仍存在超聲空白區，功率難以和罐子容積匹配及提取物中雜質較多等缺點；溶劑提取，雖然可以提高提取效率，但是也存在環境污染及溶劑損耗等問題。因而研究開發一條同時能提高五倍子單寧提取得率和純度且適于工業化生產制備工藝路線就顯得非常有意義。

發明內容：

本發明的目的是，提取過程中，利用植物內生菌發酵的方法提高五倍子中五倍子單寧的含量，發酵也使得五倍子中的五倍子單寧更易被提取出來，增加了五倍子單寧的含量的同時，也提高了提取效率，然后通過大孔吸附樹脂一步洗脫將提取物中的五倍子單寧含量提高到90%以上，為后繼進一步開發應用打下基礎。

本發明用到的內生菌是一種從五倍子中篩選分離出的一種植物乳桿菌，該種植物乳桿菌代謝過程中會產生大量和五倍子單寧代謝有關的酶，在以五倍子為原料的發酵液中，通過對發酵液的檢測發現，植物乳桿菌代謝可以顯著提高發酵液中五倍子單寧的含量，實驗發現，在發酵液中添加適量鹽膚木干燥葉片粉末，可進一步提高發酵液中五倍子單寧的含量，發酵后提取液中單寧的含量提高了近10%。本發明繼發酵后的還設計了一條通過大孔樹脂進一步純化工藝，免去了中間提取液濃縮干燥的步驟，使得整個工藝路線更節能環保。

本發明涉及的植物乳桿菌，菌株Lactobacillus Plantarum已于2020年01月16日送中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCC NO.19360,保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號 中科院微生物研究所，郵編：100101 電話：86-10-64807355。

本發明通過以下技術方案實現：

1. 一種五倍子單寧制備新工藝，其特征在于，其制備步驟為：

（1）內生菌活化發酵，植物乳桿菌活化培養得到發酵液；

（2）發酵物料準備，將五倍子和鹽膚木干燥的葉片分別粉碎，過 30 目篩，得到五倍子粉末和葉片粉末；