[發明專利]心肺五聯檢測試劑盒及其稀土納米熒光檢測卡和檢測方法

有效

• 申請號: 202010191498.X
• 申請日: 2020-03-18
• 公開（公告）號: CN111308103B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 張云;張肖;宋良
• 申請（專利權）人: 廈門稀土材料研究所
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/72;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/573;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 常州易瑞智新專利代理事務所(普通合伙) 32338
• 代理人: 徐琳淞

1.稀土納米熒光檢測卡，其特征在于：包括卡殼（1）和設置在卡殼（1）內的檢測試紙條（2）；所述檢測試紙條（2）包括底襯（21）以及沿底襯的長度方向順次搭接粘貼在底襯上的樣品墊（22）、包被膜（23）和吸水紙（24）；所述樣品墊（22）噴涂有微球線；所述微球線為稀土納米熒光微球標記的cTnI 1/CKMB 1/Myo 1/D-Dimer 1/NT-proBNP 1單克隆抗體和兔IgG抗體；所述包被膜（23）包括硝酸纖維素膜以及沿長度方向依次平行間隔設置于硝酸纖維素膜上的第一檢測線、第二檢測線、第三檢測線、第四檢測線、第五檢測線和質控線；所述第一檢測線、第二檢測線、第三檢測線、第四檢測線、第五檢測線和質控線分別包被cTnI 2/CKMB2/Myo 2/ D-Dimer 2/NT-proBNP 2和羊抗兔抗體，其中第一檢測線靠近樣品墊（22），質控線遠離樣品墊（22）；

所述稀土納米熒光微球為核殼結構釹摻雜氟化釓镥包覆氟化釔鈉，粒徑為40nm~60nm，其組成為：

NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4，

其中，NaGdxLu1-xF4為基質，摻雜離子為Nd³⁺；冒號“:”表示為釹摻雜；x和y為稀土離子摻雜摩爾百分數，x的范圍為20%～90%，y的范圍為1%~10%；

所述稀土納米熒光微球在基態下穩定，在800~1000 nm的激發光源作用下發射出波長范圍在1000~1100 nm的熒光；

所述NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4的制備方法包括：

步驟①，合成NaGdxLu1-y-xF4:yNd：在容器中，加入體積比為3~6：7~14 的油酸和1-十八烯，再按摩爾比例，加入x份Gd的硝酸鹽或醋酸鹽或氯化物，y份釹的硝酸鹽或醋酸鹽或氯化物，1-x-y份的Lu的硝酸鹽或醋酸鹽或氯化物，x和y為稀土離子摻雜摩爾百分數，x的范圍為20%～70%， y的范圍為0~30%；在室溫下混合攪拌，抽真空，隨后升溫至100~120℃，反應20~30分鐘，再升溫至150~160℃，反應10~15分鐘，得到透明溶液；自然冷卻至40~50℃，釋放真空，加入物質的量之比為1~2 ：1.6~3.4的NaOH和氟化銨甲醇混合溶液，反應20~30 min；升溫至90~100℃，抽氣換氣3~4次，通入氮氣，升溫至280~300℃，反應1~2小時，離心，用環己烷乙醇混合液洗滌3~4次，分散于環己烷中；

步驟②，制備NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4：在容器中，加入體積比為3~6 ：7~14油酸和1-十八烯，加入醋酸釔，混合攪拌，在室溫下混合攪拌，抽真空，隨后升溫至120℃，反應20分鐘，再升溫至160℃，反應10分鐘，得到透明溶液；自然冷卻至50℃，釋放真空，加入NaOH和氟化銨甲醇混合溶液，以及與油酸體積比為3~6：2~4的 NaGdxLu1-y-xF4:yNd納米探針環己烷溶液，混合攪拌，反應20~30 min；升溫至90~100℃，抽氣換氣3~4次，通入氮氣，升溫至280~290℃，反應1~2小時，離心，用環己烷乙醇混合液洗滌3~4次，分散于環己烷中；所述醋酸釔、NaOH、氟化銨物質的量之比為0.2~0.4：0.5~1 ：0.8~1.6；利用酸洗法將探針轉移至水相，再在探針表面修飾羧基，得到分散性好的水溶性NaGdxLu1-y-xF4:yNd@NaYF4稀土納米熒光微球。

2.根據權利要求1所述的稀土納米熒光檢測卡，其特征在于：所述樣品墊（22）上噴涂的稀土納米熒光微球標記的cTnI 1/CKMB 1/Myo 1/D-Dimer 1/NT-proBNP 1單克隆抗體和兔IgG抗體的含量均為50~200μg抗體/200μl熒光微球。

3.根據權利要求1所述的稀土納米熒光檢測卡，其特征在于：所述硝酸纖維素膜上的第一檢測線、第二檢測線、第三檢測線、第四檢測線、第五檢測線和質控線的間隔距離為2~4mm。

4.根據權利要求3所述的稀土納米熒光檢測卡，其特征在于：所述硝酸纖維素膜上的cTnI 2/CKMB 2/Myo 2/D-Dimer 2/NT-proBNP 2單克隆抗體包被濃度為0.1~2mg/ml、用量為0.5~1.5μl包被液量/cm膜，羊抗兔IgG抗體包被濃度為0.5~2mg/ml、用量為0.5~1.5μl包被液量/cm膜。