[發明專利]分離純化胎兒有核紅細胞的試劑盒有效
| 申請號: | 202010186566.3 | 申請日: | 2016-07-11 |
| 公開(公告)號: | CN111500534B | 公開(公告)日: | 2022-11-29 |
| 發明(設計)人: | 夏慶杰;楊林;楊雪飛 | 申請(專利權)人: | 山東亞大藥業有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/078 | 分類號: | C12N5/078 |
| 代理公司: | 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 11112 | 代理人: | 高釗;王靜 |
| 地址: | 252000 *** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 分離 純化 胎兒 紅細胞 試劑盒 | ||
1.一種從懷孕15-21周的孕婦外周靜脈血樣中分離純化胎兒有核紅細胞的試劑盒,其中包括:
紅細胞裂解液,用于對孕婦外周靜脈血樣中的無核紅細胞進行裂解處理,其中所述紅細胞裂解液為PBS配制的0.7-1.5%NH4Cl溶液,其中所述紅細胞裂解液的用量為:相對于1ml的血樣添加1ml-4ml的該裂解液,其中0.7-1.5%的單位是w/v%;
細胞固定化試劑,用于對裂解后獲得的有核細胞進行固定化處理,其中所述細胞固定化試劑為PBS配制的1-3%戊二醛溶液,以及其中所述細胞固定化試劑的用量為:相對于經裂解處理過的血樣中的固體物質添加0.5-3ml的該固定化試劑,其中1-3%的單位是v/v%;
CD45抗體標記磁珠,用于對血樣中細胞進行負篩選,以將非有核紅細胞除去;
CD71抗體標記磁珠,用于進行初次正篩選;
抗體洗脫液,用于將初次正篩選磁珠上的細胞洗脫下來,其中所述的抗體洗脫液為pH為11.5以上的堿性緩沖溶液;以及
HBG1抗體標記磁珠,用于對洗脫下的細胞進行再次正篩選。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,還包括:
FITC標記的兔抗人CD71 IgG,和
Cy3-標記的兔抗人HBG1 IgG。
3.根據權利要求1所述的試劑盒,其中CD71抗體和HBG1抗體是熒光標記的,并且兩種抗體的熒光顏色不同。
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