[發明專利]一種蕓薹鏈格孢菌代謝物在制備黃曲霉菌抑菌劑中的應用

有效

• 申請號: 202010180664.6
• 申請日: 2020-03-16
• 公開（公告）號: CN111471721B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 楊勝利;劉興泉;金建德;胡浩;何志平;吳峰華
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A01N63/30;A01P3/00;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發明公開了一種蕓薹鏈格孢菌代謝物在制備黃曲霉菌抑菌劑中的應用，所述代謝物是將蕓薹鏈格孢菌發酵液超聲破碎，過濾，濾液濃縮后用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相濃縮至恒重獲得的。本發明提供一種蕓薹鏈格孢菌代謝物對黃曲霉菌抑菌活性以及用于儲糧抑菌劑的應用。傳統抑制霉菌制劑為制霉菌素等抗生素，殘留危害較大，天然的抑菌劑將是未來市場的趨勢，該抑菌劑產量大，工藝簡單，更加安全，環保。

(一)技術領域

本發明涉及一種黃曲霉抑菌劑，特別涉及一種蕓薹鏈格孢菌代謝物在制備黃曲霉菌抑菌劑中的應用。

(二)背景技術

黃曲霉毒素引發的污染事件頻頻發生，促使廣大消費者對食品安全問題愈發重視。對此，諸多國家針對糧食和食品內黃曲霉毒素的含量進行限量設定。歐盟地區強化對食品內黃曲霉毒素含量的管控，在國際上制定出了嚴格而規范的食品黃曲霉毒素含量限量標準。近年來，隨著我國經濟社會的快速發展，人們對糧食安全的重視程度不斷提高，但是在糧食儲藏過程中，常常會出現黃曲霉毒素這一問題，嚴重影響糧食產品的安全性。研發對黃曲霉毒素進行防控，尤其是糧食儲藏過程中黃曲霉毒素的生物防控方法，有利于對黃曲霉毒素進行有效防控，使糧食安全得到保障，為我國人民提供更加優質的糧食產品。通過研究，黃曲霉毒素屬于Ⅰ類致癌物，通常來講，動物與人類也主要是借助相應的膳食渠道來攝取一定的黃曲霉毒素。等到該毒素進入到人與動物體內，會產生極強親肝性，極易引發肝臟出血、膽管增生與脂肪變性等，進而引發肝癌。

(三)發明內容

本發明目的是提供一種蕓薹鏈格孢菌代謝物在制備黃曲霉菌抑菌劑中的應用，能夠抑制黃曲霉菌的生長，并且在稻谷儲藏過程中控制黃曲霉毒素的產生。

本發明采用的技術方案是：

本發明提供一種蕓薹鏈格孢菌代謝物在制備黃曲霉菌抑菌劑中的應用，所述代謝物是將蕓薹鏈格孢菌發酵液超聲處理，使細胞破碎，過濾，濾液濃縮后用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯相濃縮至恒重獲得的。

進一步，所述蕓薹鏈格孢菌代謝物按如下方法制備：將蕓薹鏈格孢菌接種于含200mL發酵培養基的500mL錐形瓶中，28℃、180r/min培養7d，獲得發酵液；將發酵液超聲破碎后抽濾，取濾液經孔徑為0.45μm微孔濾膜過濾后，微濾液利用旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/4，用1倍體積乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯相肉眼觀察無明顯顏色變化，合并乙酸乙酯萃取相，再次利用旋轉蒸發儀濃縮至恒重，獲得蕓薹鏈格孢菌代謝物；所述發酵培養基組成：硝酸鈉3g/L，磷酸氫二鉀1g/L，硫酸鎂(MgSO₄·7H₂O)0.5g/L，氯化鉀0.5g/L，硫酸亞鐵0.01g/L，蔗糖30g/L，溶劑為蒸餾水，pH7.0～7.2。

進一步，所述蕓薹鏈格孢(Altemaria brassicae)Gb.PY-F2，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為：CCTCC M 219126，保藏日期為2019年3月6日，保藏地址為中國武漢武漢大學，郵編：430072，已在專利申請201910174849中公開。

進一步，所述超聲破碎條件為：在405W條件下，每工作3s，間歇4s，進行300次循環。

進一步，所述蕓薹鏈格孢菌發酵前先接種于PDA培養基中，置于28℃恒溫培養箱中培養7d；再用無菌打孔器將蕓薹鏈格孢菌沿著菌落邊緣打直徑為5mm的菌餅，接種于發酵培養基；PDA培養基組成：馬鈴薯200g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂15～20g/L，溶劑為蒸餾水，自然pH。

進一步，所述抑菌劑是將蕓薹鏈格孢菌代謝物溶于丙酮中，即為抑菌劑溶液；所述丙酮體積用量以蕓薹鏈格孢菌代謝物重量計為10-20mL/g。

進一步，所述黃曲霉菌為黃曲霉菌(Aspergillus flavus)CGMCC 3.4408。

進一步，所述抑菌劑為儲糧抑菌劑，所述儲糧優選稻谷，所述儲糧抑菌劑為0.1-0.5g/mL的蕓薹鏈格孢菌代謝物乙醇溶液，施用量為0.5升/噸。