[發明專利]一種從中藥斑葉蘭中提取分離的化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010173474.1
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111253352B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 劉量;鄒美佳;殷啟蒙;胡琛;盧遙;張婉菁
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C07D307/58
• 分類號: C07D307/58;A61P35/00;A61P39/06;A61P25/28
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

本發明涉及中藥的提取、分離領域，尤其涉及從斑葉蘭藥材中提取、分離和鑒定出的新化合物及其分離方法和應用。本發明提供新化合物，分子式為C₁₃H₁₂O₅，命名為goodyschle A。經研究發現本發明的新化合物具有顯著的抑制丁酰膽堿酯酶活性、中等強度的抗氧化活性和弱腫瘤細胞毒及抑制乙酰膽堿酯酶活性。

技術領域

本發明涉及中藥的提取、分離領域，尤其涉及從斑葉蘭藥材中提取、分離和鑒定出的新化合物及其分離方法，具體為一種從斑葉蘭中提取分離的化合物goodyschle A及其制備方法和應用。

背景內容

大斑葉蘭(Goodyera schlechtendaliana Rchb.f.)為蘭科斑葉蘭屬多年生草本植物，以全草入藥，為中藥斑葉蘭基源植物。生于山谷林下陰濕處，主要分布于長江以南各地及西藏。味甘、辛，性平。有潤肺止咳、補腎益氣、行氣活血、消腫解毒等功效。主治肺癆咳嗽、氣管炎、頭暈乏力、咽喉腫痛、毒蛇咬傷等癥。具有很高的藥用價值，民間還用于制作藥膳。

然而國內外關于斑葉蘭的化學成分的報道較少。目前，僅報道從中分離得到黃酮、有機酸等二十多個化合物，物質基礎尚不明確。因此亟待對斑葉蘭的化學成分進行深入研究，分離其中的活性成分。

發明內容

發明目的：針對上述問題，本發明提供了一種從斑葉蘭中提取分離的新化合物goodyschle A及其制備方法和應用，經研究發現本發明的新化合物具有顯著的抑制丁酰膽堿酯酶活性、中等強度的抗氧化活性和弱腫瘤細胞毒及抑制乙酰膽堿酯酶活性。同時提供一種針對本發明新化合物的簡便、快速、純度高的提取分離方法。

技術方案：本發明提供的所述新化合物分子式為C₁₃H₁₂O₅，命名為goodyschle A，化學結構式為：

上述化合物的制備方法，包括以下步驟：

A)將斑葉蘭干燥藥材用95％乙醇溶液提取后，過濾，合并濾液，再減壓濃縮干燥，獲得95％乙醇提取物；

B)將95％乙醇提取物加水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位；

C)將乙酸乙酯部位進行色譜分離純化，得到純的新化合物。

上述步驟C)乙酸乙酯部位進行色譜分離純化的步驟為：

1)將乙酸乙酯部位在硅膠上進行柱層析，用體積比為(20∶1)～(0∶1)的二氯甲烷-丙酮梯度洗脫，獲得二氯甲烷-丙酮洗脫物；作為優選地，所述體積比為20∶1、10∶1、3∶1、1∶1、1∶3、0∶1的二氯甲烷-丙酮梯度洗脫；

2)取二氯甲烷-丙酮洗脫物再進行硅膠柱層析，用體積比為(30∶1)～(0∶1)的石油醚-丙酮梯度洗脫，得石油醚-丙酮洗脫物；作為優選地，所述體積比為30∶1、10∶1、2∶1、1∶3、0∶1的石油醚-丙酮梯度洗脫；

3)取石油醚-丙酮洗脫物進行凝膠柱色譜分離，用體積比為2∶1的三氯甲烷-甲醇洗脫，得到三氯甲烷-甲醇洗脫物；

4)取三氯甲烷-甲醇洗脫物經半制備高效液相色譜純化，用體積比為3∶2的甲醇-水洗脫，從甲醇-水洗脫液中得到純的新化合物。

具體地，所述步驟C)乙酸乙酯部位進行色譜分離純化的具體步驟為：用體積比為(20∶1)～(0∶1)的二氯甲烷-丙酮梯度洗脫，合并后得10個流份；流份3經硅膠柱層析，用體積比為(30∶1)～(0∶1)的石油醚-丙酮梯度洗脫，合并后得10個流份；流份7經Sephadex LH-20柱層析，用體積比為2∶1的氯仿-甲醇洗脫，合并后得6個流份；流份3經半制備高效液相色譜純化，用體積比為3∶2的甲醇-水洗脫，收集主峰，得到該化合物。