[發明專利]用于檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的IgM抗體的試劑盒

在審

• 申請號: 202010172186.4
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111398597A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 張志棟;張凱;李雁飛
• 申請（專利權）人: 中科歐蒙未一（北京）醫學技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/545;G01N33/543
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 孟凡宏;袁森

本申請公開了用于用免疫印跡法檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS?CoV?2的IgM抗體的試劑盒。本申請還公開了該試劑盒在制備診斷新型冠狀病毒SARS?CoV?2感染的產品中的用途。本申請提供的試劑盒，具有操作時間短、成本低、對機器依賴性低、可同時利用S蛋白和N蛋白進行檢測、檢測成本低、檢測效率高且檢測準確率高等優點。

技術領域

本申請涉及用于檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的 IgM抗體的試劑盒。更具體地，本申請涉及用于用免疫印跡法檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的IgM抗體的裝置、用于用免疫印跡法檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的IgM抗體的試劑盒、用免疫印跡法檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的IgM 抗體的方法、純化S蛋白抗原和純化N蛋白抗原的組合或該裝置或該試劑盒在檢測樣品中抗新型冠狀病毒SARS-CoV-2的IgM抗體中的用途、以及純化S蛋白抗原和純化N蛋白抗原的組合或該裝置或該試劑盒在制備診斷新型冠狀病毒SARS-CoV-2感染的產品中的用途。

背景技術

2019年12月以來，在世界各地爆發了新型冠狀病毒(即嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2，SARS-CoV-2)導致的肺炎疫情，此次流行的非典型肺炎是一種急性呼吸道傳染病，其主要通過近距離空氣飛沫和密切接觸傳播，起病急、傳播快、病死率高，因此危害極大。

針對上述疫情，如何快速、準確地檢測出患者是否患有新型冠狀病毒肺炎至關重要。

目前，檢測新型冠狀病毒SARS-COV-2的一種方法是核酸檢測，其主要是基于熒光定量PCR(qRT-PCR)對病毒核酸進行檢測，檢測基因包括ORF1ab及N基因，除此之外核酸檢測還包括基于 CRISPR的快速檢測方法Sherlock，其識別基因為ORF1ab及S基因。目前，上述核酸檢測方法被定為新冠病毒檢測的金標準，但核酸檢測目前存在最大的問題是假陰性。造成核酸檢測假陰性的原因有很多，包括臨床采樣的誤差。實際上，在臨床檢驗過程中，鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、糞便等標本中均可檢測出新型冠狀病毒核酸，但由于采樣方法和采樣時間的限制，目前最常用的樣本是上呼吸道樣本。但是，病毒性肺炎患者在下呼吸道具有更高的病毒載量，所以下呼吸道分泌物的檢出率會更高一些。然而，獲取肺泡灌洗液等下呼吸道樣本操作上要求較高，且易噴濺，傳播風險高，比較耗時，最終導致采集到的樣本不能反映患者或肺炎疑似患者的真實狀況。此外，樣本運輸的限制也是導致核酸檢測出現假陰性的又一原因。各種RNA病毒的核酸由于自降解和生物酶介導的降解，是最難以穩定保存的生物分子之一，其對樣本的儲存和運輸條件要求較高。但目前的檢測條件無法做到床旁檢測，從采樣到實際實驗檢測須經過漫長的等待時間，樣本在一定程度上不能準確反映被檢測者真實信息。除此之外，核酸檢測還存在耗時長、設備昂貴等問題。

此外，檢測新型冠狀病毒SARS-COV-2的另一種方法是蛋白檢測。目前主要為新冠病毒IgM/IgG抗體檢測試劑盒，其應用的方法學主要包括免疫層析(膠體金法)、化學發光、ELISA、免疫熒光等等。但是，膠體金等檢測方法無法同時對樣本中的S蛋白和N蛋白進行檢測，只能對兩種蛋白進行單一指標檢測，在實驗操作、產品和時間消耗方面不占優勢。

于此同時，現有的研究表明，在傳染過程中IgM是人體免疫系統中先出現的抗體，檢測隱性感染新型冠狀病毒SARS-COV-2人員體內的IgM抗體具有敏感性高、診斷時間早、能判定量疑似者是否感染等優點，對有效控制新型冠狀病毒SARS-COV-2的大規模傳播具有重要的意義。

因此，非常需要開發一種用于檢測樣品中抗新型冠狀病毒 SARS-CoV-2的IgM抗體的新型試劑盒，以避免核酸檢測中出現的樣本采集操作困難、采集后的樣本不能準確反應肺炎疑似患者真實病情、樣本保存困難等問題，同時具有操作時間短，成本低，對機器依賴性低等優點，并且還可同時對S蛋白和N蛋白進行檢測，既降低了檢測成本，又明顯縮短了檢測時間且提高了檢測效率和檢測準確度。

發明內容