[發明專利]一種熒光顯微鏡成像系統及其熒光成像方法

在審

• 申請號: 202010170765.5
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN113391437A
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發明（設計）人: 張大慶
• 申請（專利權）人: 平湖萊頓光學儀器制造有限公司
• 主分類號: G02B21/00
• 分類號: G02B21/00;G02B21/06;G02B21/36;G01N21/64
• 代理公司: 北京隆源天恒知識產權代理事務所(普通合伙) 11473
• 代理人: 陳雪飛

1.一種熒光顯微鏡成像系統，其特征在于，包括：

一載物平臺，用于放置待觀察的一目標物，所述目標物添加一熒光物質；

一可變波長熒光光源，位于所述載物平臺的上方，用于提供對應于不同激發波長的一激發光束給所述目標物，其中當所述激發光束照射在添加于所述目標物的所述熒光物質上后，會激發所述熒光物質發出對應于不同發射波長的一發射光束；

一用戶輸入接口，用于提供一使用者輸入所述激發光束的一波長范圍與一波長調整值，其中所述波長范圍包括一最大波長以及一最小波長，；

一控制單元，耦接于所述復數組熒光濾鏡模塊及所述用戶輸入接口，用于依據所述使用者輸入的所述波長范圍與所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束的激發波長；以及

一熒光成像單元，用于拍攝所述目標物，以在每秒內產生復數張熒光圖像；其中，當所述控制單元根據所述波長范圍跟所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束的所述激發波長，所述熒光成像單元能夠擷取所述發射光束在不同波長下的復數張熒光圖像；

一計算單元，耦接于所述熒光成像單元，用于計算所述復數張熒光圖像的清晰度；以及

一決定單元，耦接于所述計算單元，用于從所述復數張熒光圖像中決定一最清晰熒光圖像。

2.如權利要求1所述的熒光顯微鏡成像系統，其特征在于，所述控制單元會先調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束對應至最大激發波長，并于每隔一預定時間間隔后根據所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束，直到調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束對應至最小激發波長被為止。

3.如權利要求1所述的熒光顯微鏡成像系統，其特征在于，其中綠光對應的激發波長為460nm-550nm、發射波長為590nm,藍光對應的激發波長為420nm-485nm、發射波長為515nm,紫光對應的激發波長為395nm-415nm、發射波長為455nm,紫外光對應的激發波長為330nm-400nm、發射波長為425nm。

4.如權利要求1所述的熒光顯微鏡成像系統，其特征在于，所述熒光成像單元會將所述目標物分割成mxn個區域，針對每個區域會拍攝p張熒光塊圖像，其中每個區域的所述p張熒光塊圖像分別是在所述發射光束的相同波長下所擷取的。

5.如權利要求4所述的熒光顯微鏡成像系統，其特征在于，所述決定單元先默認一第一張熒光圖像作為最終輸出的主圖圖像，之后針對每個區域，所述計算單元會計算p張熒光塊圖像的清晰度，若一特定熒光塊圖像的清晰度大于所述主圖圖像上的該區域的最高清晰度，則更新所述最高清晰度值，同時所述決定單元利用所述特定熒光塊圖像取代所述主圖圖像上該區域的默認熒光塊圖像。

6.一種熒光成像方法，適用于一熒光顯微鏡成像系統，所述熒光顯微鏡成像系統包括用于提供一激發光束給添加一熒光物質的一目標物的一可變波長熒光光源以及用于拍攝所述目標物以在每秒內產生復數張熒光圖像的一熒光成像單元，其特征在于，該方法包括以下步驟：

提供一用戶輸入接口給一使用者輸入所述激發光束的一波長范圍與一波長調整值；

依據所述使用者輸入的所述波長范圍與所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束的激發波長；

當根據所述波長范圍跟所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束的激發波長時，控制所述熒光成像單元能夠擷取所述發射光束在不同波長下的復數張熒光圖像；

計算所述復數張熒光圖像的清晰度；以及

從所述復數張熒光圖像中決定一最清晰熒光圖像。

7.如權利要求6所述的熒光成像方法，其特征在于，依據所述使用者輸入的所述波長范圍與所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束的激發波長的步驟另包括：

先調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束對應至最大激發波長，并于每隔一預定時間間隔后根據所述波長調整值來調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束，直到調整所述可變波長熒光光源的所述激發光束對應至最小激發波長被為止。