[發(fā)明專利]一種基于膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010158610.X
• 申請(qǐng)日: 2020-03-09
• 公開（公告）號(hào): CN111273004A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陸建
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京華晟源醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京律遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11574
• 代理人: 王冠宇

本發(fā)明公開了一種基于膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條及制備方法，所述試劑條包括玻璃纖維、硝酸纖維膜、吸水紙、金標(biāo)墊、塑料底板、檢測(cè)線包被HIV?I/II抗原、對(duì)照線包被鼠IgG，所述塑料底板上設(shè)置有玻璃纖維、硝酸纖維膜、吸水紙、金標(biāo)墊，所述硝酸纖維膜兩端左右分別相對(duì)設(shè)置金標(biāo)墊、吸水紙，所述金標(biāo)墊外端搭接玻璃纖維，所述檢測(cè)線包被HIV?I/II抗原混合包被在硝酸纖維膜上，所述金標(biāo)墊上固化有膠體金標(biāo)記SPA。本發(fā)明通過增加組合抗原片段的方式提高了HIV?1型抗體檢出率，該發(fā)明的試紙條靈敏度高，適于醫(yī)院、個(gè)人進(jìn)行艾滋病初篩，檢測(cè)時(shí)間短，準(zhǔn)確率高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條及其制備方法。

背景技術(shù)

現(xiàn)有的艾滋病檢測(cè)首先通過初步篩選然后進(jìn)行確診，初步篩選主要通過血液檢測(cè)、口腔粘膜檢測(cè)兩種方式進(jìn)行，血液檢測(cè)需要抽取待測(cè)人血液，存在交叉感染的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)使用的器械處理不當(dāng)存在感染風(fēng)險(xiǎn)；口腔粘膜檢測(cè)采樣操作繁瑣，需要不斷刮取滲透液，必須由經(jīng)培訓(xùn)的專業(yè)人士操作，否則對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確性有較大影響。鑒于以上弊端，本申請(qǐng)人通過工藝的改進(jìn)不斷的創(chuàng)新，研發(fā)出一種新的膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條，以作為艾滋病檢測(cè)初步篩選試劑條，操作方便、快速，無創(chuàng)采樣，適用于普通人群自測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種基于膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條及其制備方法，該發(fā)明能夠快速檢測(cè)艾滋病陽性，

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。

一種基于膠體金法檢測(cè)尿液中HIV(l+2)抗體試劑條，所述試劑條包括玻璃纖維膜、硝酸纖維膜、吸水紙、金標(biāo)墊、塑料底板、檢測(cè)線包被HIV-I/II抗原、對(duì)照線包被鼠IgG，所述塑料底板上設(shè)置有玻璃纖維膜、硝酸纖維膜、吸水紙、金標(biāo)墊、檢測(cè)線包被HIV-I/II抗原、對(duì)照線包被鼠IgG，所述硝酸纖維膜兩端左右分別相對(duì)搭接金標(biāo)墊、吸水紙，所述金標(biāo)墊外端搭接玻璃纖維膜，所述金標(biāo)墊上固化有膠體金標(biāo)記SPA，所述以膠體金標(biāo)記的SPA膠體金結(jié)合物墊，作為顯色探針，所述硝酸纖維素膜上檢測(cè)線混合包被HIV-I/II抗原、對(duì)照線包被鼠IgG，對(duì)照線包被鼠IgG與檢測(cè)線包被HIV-I/II抗原相對(duì)設(shè)置。

進(jìn)一步，所述在硝酸纖維素膜上檢測(cè)線包被HIV-I/II抗原包括gp41+gp36融合抗原，作為檢測(cè)HIV 1型抗體和HIV 2型抗體的檢測(cè)線。

進(jìn)一步，所述在硝酸纖維素膜2上檢測(cè)線包被HIV-I/II抗原6還包括gp120抗原，作為檢測(cè)HIV 1型抗體檢測(cè)線。

進(jìn)一步，金標(biāo)墊的制備方法如下：

1)標(biāo)記SPA,以0.1M硼酸-硼砂緩沖液調(diào)節(jié)膠體金PH在8.0-8.5，10-20μg/ml金的比例加入SPA,震蕩反應(yīng)10-30分鐘后，以BSA或casein進(jìn)行封閉，封閉液的終濃度5-10mg/ml,10000rpm離心10-20min分鐘,棄上清，沉淀復(fù)溶至原體積10％；

2)復(fù)溶液為含有PEG、BSA、Casein、蔗糖、Tween-20的50mM Tris-Hcl(pH8.5-9.0)緩沖液；

3)用噴金儀將復(fù)溶液均勻噴涂于玻璃纖維膜膜上，噴金濃度為4.5μl/cm,于25℃，濕度10-30％，烘干處理，16-24h。

進(jìn)一步，在硝酸纖維素膜上包被的gp41+gp36融合抗原濃度為1.5-2.5mg/ml，gp120抗原濃度為0.25-0.5mg/ml。

進(jìn)一步，所述gp41+gp36融合抗原與gp120抗原采用混合包被一條檢測(cè)線。

進(jìn)一步，所述檢測(cè)線包被緩沖液為pH8.9、50mM的Tris-HCl緩沖液。