[發(fā)明專利]一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010158610.X
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111273004A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陸建
• 申請（專利權(quán)）人: 北京華晟源醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京律遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11574
• 代理人: 王冠宇

1.一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條，其特征在于：所述試劑條包括玻璃纖維膜(1)、硝酸纖維膜(2)、吸水紙(3)、金標(biāo)墊(4)、塑料底板(5)、檢測線包被HIV-I/II抗原(6)、對照線包被鼠IgG(7)，所述塑料底板(5)上設(shè)置有玻璃纖維膜(1)、硝酸纖維膜(2)、吸水紙(3)、金標(biāo)墊(4)、檢測線包被HIV-I/II抗原(6)、對照線包被鼠IgG(7)，所述硝酸纖維膜(2)兩端左右分別相對搭接金標(biāo)墊(4)、吸水紙(3)，所述金標(biāo)墊(4)外端搭接玻璃纖維膜(1)，所述金標(biāo)墊(4)上固化有膠體金標(biāo)記SPA，所述以膠體金標(biāo)記的SPA膠體金結(jié)合物墊，作為顯色探針，所述硝酸纖維素膜2上檢測線混合包被HIV-I/II抗原6、對照線包被鼠IgG(7)，對照線包被鼠IgG(7)與檢測線包被HIV-I/II抗原(6)相對設(shè)置。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條，其特征在于：所述在硝酸纖維素膜(2)上檢測線包被HIV-I/II抗原(6)包括gp41+gp36融合抗原，作為檢測HIV 1型抗體和HIV 2型抗體的檢測線。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條，其特征在于：所述在硝酸纖維素膜(2)上檢測線包被HIV-I/II抗原(6)還包括gp120抗原，作為檢測HIV 1型抗體檢測線。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條的制備方法，其特征在于，金標(biāo)墊的制備方法如下：

1)標(biāo)記SPA,以0.1M硼酸-硼砂緩沖液調(diào)節(jié)膠體金PH在8.0-8.5，10-20μg/ml金的比例加入SPA,震蕩反應(yīng)10-30分鐘后，以BSA或casein進(jìn)行封閉，封閉液的終濃度5～10mg/ml,10000rpm離心10-20min分鐘,棄上清，沉淀復(fù)溶至原體積10％；

2)復(fù)溶液為含有PEG、BSA、Casein、蔗糖、Tween-20的50mM Tris-Hcl(pH8.5-9.0)緩沖液；

3)用噴金儀將復(fù)溶液均勻噴涂于玻璃纖維膜膜上，噴金濃度為4.5μl/cm,于25℃，濕度10-30％，烘干處理，16-24h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條的制備方法，其特征在于，在硝酸纖維素膜上包被的gp41+gp36融合抗原濃度為1.5-2.5mg/ml，gp120抗原濃度為0.25-0.5mg/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條的制備方法，其特征在于，所述gp41+gp36融合抗原與gp120抗原采用混合包被一條檢測線。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條的制備方法，其特征在于，所述檢測線包被緩沖液為pH8.9、50mM的Tris-HCl緩沖液。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條的制備方法，其特征在于，所述金標(biāo)墊的制備方法采用膠體金標(biāo)記鼠抗人IgG或SPA中的任意一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8所述的一種基于膠體金法檢測尿液中HIV(l+2)抗體試劑條檢測筆，其特征在于：所述試劑條安置于檢測筆內(nèi)，所述檢測筆分為上、下兩部分，且上、下兩部分采用卡接方式固定，位于所述檢測筆下部分筆體內(nèi)開有安置槽與試劑條匹配，所述檢測筆末端開有檢測口(71)，所述檢測筆上部分中間位置開有可視窗口(72)。