[發明專利]一種檢測鹽酸溴己新吸入溶液中N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的方法

有效

• 申請號: 202010156036.4
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111398442B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 周鑫;張冠軍;許娜娜;孫向陽
• 申請（專利權）人: 南京華蓋制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 劉妍妍

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種檢測鹽酸溴己新吸入溶液中N?(2?硝基芐)–N?甲基環己胺的方法，包括以下步驟：配制供試品溶液和對照品儲備液；取供試品溶液和一定濃度梯度的對照品儲備液分別進樣，用高效液相色譜儀進行檢測，記錄色譜圖；對照品儲備液的各質量濃度及色譜圖峰面積進行線性回歸分析，得回歸方程和相關系數，制作出標準曲線；利用供試品溶液的色譜圖中N?(2?硝基芐)–N?甲基環己胺的峰面積，按外標法計算獲得N?(2?硝基芐)–N?甲基環己胺的含量。本發明提供的檢測方法，樣品處理過程操作簡單，檢測結果準確，靈敏度高，穩定性好。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種檢測鹽酸溴己新吸入溶液中N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的方法。

背景技術

N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺，化學名N-cyclohexyl-N-methyl-o-nitrobenzylamine，是一種典型的氮氧自由基，主要作為鹽酸溴己新的醫藥中間體。鹽酸溴己新是由植物中提取出的鴨咀花堿半合成而得，這種藥物成分可以斷裂和減少人體痰液中粘多糖纖維，降低人體痰液的粘度，使得患者容易咳出痰液。N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺結構如下：

但是，基于結構毒性相關性理論，N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺屬于潛在的基因毒性雜質，根據國際藥品協調會議(ICH)關于基因毒性雜質的指導原則要求，基因毒性雜質嚴重威脅人類健康，一般使用被定義為毒理學關注閾值(TTC)的方法來評估基因毒性雜質在原料藥中的可接受限度，而一個1.5μg/day的TTC值，即相當于每天攝入1.5μg的基因毒性雜質，被認為對于大多數藥品來說是可以接受的風險(一生中致癌風險小于十萬分之一)。按照這個閾值，可以根據預期的每日攝入量計算出原料藥中可接受的基因毒性雜質水平。因此如果某種可能含有N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的藥品的日劑量為12mg，那么其TTC水平為125ppm,如果日劑量更高，那么TTC水平更低，因此需要建立一種快速、高效且高靈敏度的方法測定藥品中N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺殘留。目前尚未見文獻報道該化合物的相關檢測方法，急需建立一種操作簡單，結果準確，靈敏度高，可用于鹽酸溴己新吸入溶液中基因毒性雜質N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺殘留含量的測定方法。

基于結構毒性相關性理論，N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺屬于潛在的基因毒性雜質，根據國際藥品協調會議(ICH-M7)關于基因毒性雜質的指導原則要求，基因毒性雜質嚴重威脅人類健康。由于此類雜質檢測在靈敏度、選擇性、待測物穩定性、基質復雜性等方面呈現特殊要求，因此在分析方法的開發和選擇上具有與其他藥物雜質檢測不同的特點。目前尚未見文獻報道該化合物的相關檢測方法，因此急需建立一種操作簡單，結果準確，靈敏度高，可用于鹽酸溴己新吸入溶液中基因毒性雜質N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺殘留含量的測定方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于，克服現有技術的缺陷，提供一種具有操作簡單、精密度好、回收率高、檢測限低等特點的測定N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺含量的液相色譜方法，可用于溴己新吸入溶液中基因毒性雜質N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺殘留的質量控制。

為解決上述技術問題，本發明提供一種檢測鹽酸溴己新吸入溶液中N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的方法，用高效液相色譜進行檢測，采用外標法定量法分析，具體包括以下步驟：

配制供試品溶液和對照品儲備液；

取供試品溶液和一定濃度梯度的對照品儲備液分別進樣，用高效液相色譜儀進行檢測，記錄色譜圖；

對照品儲備液的各質量濃度及色譜圖峰面積進行線性回歸分析，得回歸方程和相關系數，制作出標準曲線；利用供試品溶液的色譜圖中N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的峰面積，按外標法計算獲得N-(2-硝基芐)–N-甲基環己胺的含量。

進一步的，高效液相色譜儀測定時采用梯度洗脫。