[發(fā)明專利]一種細梗薔薇愈傷細胞提取物及其在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010150699.5
• 申請日: 2020-03-06
• 公開（公告）號: CN111202777B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李惠玲;章漳;周雨露;黃俊
• 申請（專利權(quán)）人: 伽藍（集團）股份有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A61K36/738;A61K8/99;A61P17/02;A61Q19/02;A61Q19/08
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1.一種細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物作為所述皮膚外用劑中的抗衰老活性成分和美白活性成分，所述細梗薔薇愈傷細胞的培養(yǎng)方法為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)中的任意一種；其中，所述固體培養(yǎng)包括下述步驟：

A、取試劑MS培養(yǎng)基， 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），激動素（KT），蔗糖，瓊脂，冰川水；

B、根據(jù)MS、2,4-D3.0mg/L、KT0.5mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，以冰川水為溶劑配制成培養(yǎng)基；

C、所述固體培養(yǎng)基的PH值調(diào)節(jié)至5.7-5.8，在滅菌鍋內(nèi)121℃條件下滅菌20min，制得固體培養(yǎng)基；

D、在培養(yǎng)容器內(nèi)，加入10%-20%瓶體積的固體培養(yǎng)基，待固體培養(yǎng)基凝固后，接種培養(yǎng)基體積1%-2%的愈傷組織細胞，培養(yǎng)條件為溫度19-21℃，濕度60%-75%，光照強度1500Lx-2000Lx，每天光照12小時；

E、培養(yǎng)20天后收獲細梗薔薇愈傷細胞；

所述液體培養(yǎng)包括下述步驟：

A、取試劑MS培養(yǎng)基， 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），激動素（KT），蔗糖，冰川水； B、根據(jù)MS、2,4-D3.0mg/L、KT0.5mg/L、蔗糖30g/L，以冰川水為溶劑配制成培養(yǎng)基；

C、所述培養(yǎng)基的PH值調(diào)節(jié)至5.7-5.8，在滅菌鍋內(nèi)121℃滅菌20min制得液體培養(yǎng)基；

D、在培養(yǎng)容器內(nèi)，加入20%-30%瓶體積的液體培養(yǎng)基，接種液體培養(yǎng)基體積1%-2%的愈傷組織細胞，放入搖床內(nèi)培養(yǎng)，溫度為24-26℃，轉(zhuǎn)速110r/min；

E、培養(yǎng)20天后收獲細梗薔薇愈傷細胞；

所述細梗薔薇愈傷細胞提取包括下述步驟：

A、稱取所述細梗薔薇愈傷細胞，研磨破碎；

B、加入細梗薔薇愈傷細胞5倍體積的去離子水，浸沒攪拌；

C、500W超聲提取2次，每次30min，5000rmp離心10min，取上清過濾，濾液合并；

D、冷凍干燥，得到細梗薔薇愈傷細胞提取物。

2.如權(quán)利要求1所述的一種細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于所述抗衰老成分為清除皮膚自由基、及增加皮膚細胞增殖、及保護皮膚細胞氧化損傷、及保護皮膚細胞遭UVA造成損傷的抗衰老活性成分。

3.如權(quán)利要求1所述的一種細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于所述美白活性成分為抑制人源表皮黑色素細胞B16的酪氨酸酶活性和黑色素的生成量的美白活性成分。

4.一種包括如權(quán)利要求2-3所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于，在所述的皮膚外用劑中，所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物的含量為0.001％-1％，所述的百分比是指所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物的質(zhì)量占所述的皮膚外用劑總質(zhì)量的百分比。

5.一種包括如權(quán)利要求4所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于，在所述的皮膚外用劑中，所述的細梗薔薇愈傷細胞提取物的含量為0.1％-1％。

6.如權(quán)利要求1任一所述的一種細梗薔薇愈傷細胞提取物在制備皮膚外用劑中的應(yīng)用，其特征在于所述冰川水取自喜馬拉雅山北坡的多吉曲登尼瑪，海拔5128 米。