[發明專利]一種檢測三氯殺螨醇的試紙條及方法

在審

• 申請號: 202010146384.3
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111289752A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 萬宇平;王兆芹;崔海峰;宋灝;趙正苗;凡靜靜;任西杰;郝曉娜
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/53
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本發明公開了一種檢測三氯殺螨醇的試紙條及方法。該試紙條包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板，所述反應膜上具有包被有三氯殺螨醇半抗原?載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線，所述結合物釋放墊上噴涂有三氯殺螨醇單克隆抗體?膠體金標記物。本發明還提供一種應用上述試紙條檢測水果樣品中三氯殺螨醇的方法。本發明提供的試紙條具有操作簡單、靈敏度高、檢測速度快、成本低、適于大批量樣本篩查等優點，能夠滿足我國食品監管部門開展現場監控和檢測工作。

技術領域

本發明涉及一種檢測三氯殺螨醇的試紙條及方法，具體涉及一種用于檢測三氯殺螨醇的膠體金試紙條，其特別適用于水果中三氯殺螨醇殘留的檢測。

背景技術

三氯殺螨醇(dicofol)是一種有機氯殺螨劑，可防治棉花、果樹、蔬菜等農作物上的螨類，對成螨、若螨、卵有很強的觸殺和胃毒作用，藥效期和速效期長。研究表明，該藥物對人畜有一定毒性，主要中毒癥狀為頭痛、頭暈、多汗、胸悶、瞳孔散大、視物不清，以及惡心、嘔吐、腹瀉，局部接觸可引起接觸性皮炎。我國已將三氯殺螨醇禁用，國家標準GB2763-2019《食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量》中也規定了水果中三氯殺螨醇的殘留限量為1mg/kg。

目前已報道的檢測三氯殺螨醇的方法主要是氣相色譜法、氣相色譜-質譜法和液相色譜串聯質譜法等儀器方法。這些方法均須在實驗室條件下操作，樣品前處理繁瑣費時，還需配備昂貴的儀器設備，檢測成本較高、耗時長、操作復雜，在實際應用過程中有很大的限制性，難以滿足大量樣品和現場樣品快速檢測的需要。因此，開發一種簡單快速、適用于水果中三氯殺螨醇殘留的膠體金試紙條，可滿足大量樣品現場篩選和監控，能夠更好地滿足我國食品監管部門等開展檢測工作。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠檢測水果中三氯殺螨醇殘留的膠體金試紙條，并且提供一種高效、準確、簡便、適于現場監控和大量樣本篩查的檢測方法。

本發明所提供的檢測三氯殺螨醇的試紙條，包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板；所述反應膜上具有包被有三氯殺螨醇半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線；所述結合物釋放墊上噴涂有三氯殺螨醇單克隆抗體-膠體金標記物。

所述三氯殺螨醇單克隆抗體是以三氯殺螨醇半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得。

所述三氯殺螨醇半抗原-載體蛋白偶聯物由三氯殺螨醇半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白或人血清白蛋白，所述三氯殺螨醇半抗原是由鄰氯苯乙酸、氯苯和三氯乙醛在硫酸的催化下反應得到，其分子結構式為：

所述樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊依次粘貼在底板上，所述結合物釋放墊1/3～1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

所述底板可為PVC底板或其他硬質不吸水的材料；所述樣品吸收墊可為吸濾紙或濾油紙；所述結合物釋放墊可為玻璃棉或聚酯材料；所述吸水墊為吸水紙；所述反應膜可為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜。

本發明的另一個目的是提供一種制備上述試紙條的方法，其包括步驟：

1)制備噴涂有三氯殺螨醇單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2)制備具有包被有三氯殺螨醇半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

3)將1)和2)制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

具體地說，步驟包括：

1)由鄰氯苯乙酸、氯苯和三氯乙醛在硫酸的催化下反應，制備三氯殺螨醇半抗原；

2)將三氯殺螨醇半抗原與載體蛋白偶聯，制備三氯殺螨醇半抗原-載體蛋白偶聯物；