[發明專利]一種血清ETHE1蛋白自身抗體檢測的方法

有效

• 申請號: 202010142814.4
• 申請日: 2020-03-04
• 公開（公告）號: CN111239398B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 王紅葉;李永哲;韓曉紅;姚林
• 申請（專利權）人: 北京三品醫療科技有限公司;醫靈（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發明提供了一種新的血清ETHE1蛋白自身抗體的檢測試劑盒及其應用。該試劑盒包括固相載體以及包被于固相載體上的抗原，所述抗原是ETHE1蛋白。本發明能夠檢測出與所述抗原蛋白有親和力的ETHE1自身抗體的水平，提供了一種以自身抗體為指標進行癌癥篩選的新方法。

技術領域

本發明屬于體外醫學診斷技術領域，更特定的，涉及一種新的血清ETHE1 蛋白自身抗體檢測的方法。

背景技術

根據世界衛生組織數據顯示，2018年，全球新患癌癥人數達1810萬人， 960萬人因癌癥死亡。2018年全球發生209萬例肺癌新病例，在所有癌癥類型中排名第一。肺癌在組織學上可分為兩大類：小細胞肺癌(SCLC)和非小細胞肺癌(NSCLC)。NSCLC約占診斷出肺癌的79％，包括腺癌，鱗狀細胞癌和大細胞癌。盡管近年來針對肺癌的靶向療法和免疫療法取得了巨大進步，但外科切除，輔助放療和/或化療仍然是早期治療NSCLC患者的首選方法。當前，胸部高分辨率(或小劑量)計算機斷層掃描(LDCT)是唯一可有效降低肺癌早期死亡率的篩查試驗。但其臨床轉化仍然是問題。LDCT的問題還在于較高的假陽性率一定程度上會導致過度診斷。重復暴露于放射線也可能會導致潛在的健康危害。因此，發現用于早期肺癌診斷的非侵入性血清學生物標記物將大大有利于肺癌的干預和預防。采用基于生物標志物的初始篩選后進行 LDCT或將生物標志物測試與LDCT相結合的方法成為了更好的肺癌診斷手段。

近年來研究發現，有望通過在癌癥患者血清內檢測到高表達(相對于健康人和良性腫瘤)的自身抗體來實現腫瘤相關自身抗體檢測。當前的在臨床中運用得比較多的是腫瘤相關抗原，例如碳水化合物抗原(CA)125，CA19-9，癌胚抗原(CEA)和α胎兒蛋白(AFP)。這些標志物在血清中的含量是隨著腫瘤大小的增長而增高的，所以腫瘤相關抗原在癌癥早期的靈敏度和特異性都非常差。自身抗體在腫瘤發生的早期產生，可在出現臨床癥狀之前五年被檢測到。在癌癥早期，檢測出來的腫瘤相關抗原的信號非常弱，但由于自身抗體的濃度遠遠高于抗原，所以檢測自身抗體相當于得到了一個放大的信號。自身抗體在血液循環中的半衰期達到了30天，在體外也比其他的標志物要穩定。自身抗體檢測具有經濟合算、操作簡便等優點。自身抗體檢測可以直接在現有的臨床檢測平臺利用存檔的血清實現。

ETHE1(Ensembl:ENSG00000105755 MIM:608451)由19號染色體上的 ETHE1基因編碼，在結腸(RPKM 85.9)，十二指腸(RPKM 30.9)和其他20 個組織中廣泛表達。ETHE1蛋白催化過硫化物底物氧化為亞硫酸鹽。目前已有一些研究顯示ETHE1蛋白自身抗體水平與癌癥發生存在相關性，但仍未有將其作為癌癥診斷標志物的確切報道。發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種新的自身抗體生物標志物，發展出一套適用于癌癥檢測的方法。

本發明的檢測方法和原理為將ETHE1蛋白固相在固相載體上，血清孵育后，血清中ETHE1自身抗體(主要包括IgG、IgA型抗體，也有一些其它類型的抗體)會結合上去，清洗去除未結合的抗體和其它蛋白質，通過檢測顯色或發光信號來判斷ETHE1自身抗體的數量。

本發明提供了以下技術方案：

一種用于檢測哺乳動物血清ETHE1蛋白自身抗體的試劑盒，包括固相載體、包被于固相載體上的抗原以及檢測試劑，所述抗原為ETHE1蛋白。

進一步的，如上所述的試劑盒檢測的自身抗體為IgG、IgA和/或其它類型的抗體。

再進一步可選的，如上所述的試劑盒中所述固相載體包括：酶標微孔板、微粒、微球、親和膜、液相芯片、玻片、試紙條和塑料球。

再進一步可選的，如上所述的試劑盒中所述ETHE1蛋白是通過直接包被法固定在固相載體上的，所述直接包被法是將ETHE1蛋白直接固定于固相載體上。