[發明專利]一種強化丙酸厭氧降解的復合菌劑及其構建方法

有效

• 申請號: 202010133845.3
• 申請日: 2020-02-28
• 公開（公告）號: CN111304124B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 汪濤;匡彬;朱葛夫;郟建波;劉敏超;李玉瑛;李冰;楊濤;張夢辰;徐曉龍
• 申請（專利權）人: 五邑大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F3/28;C02F3/00;C12R1/01;C02F101/34
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文

1.一種復合菌劑，其特征在于，所述復合菌劑包括Syntrophobacter fumaroxidans和Geobacter sulfurreducens；

所述Syntrophobacter fumaroxidans為德國菌種保存庫編號為DSMZ：10017的菌株；所述Geobacter sulfurreducens為美國模式菌種收集中心編號為ATCC：51573的菌株；

所述復合菌劑的由以下方法制備而成：

(1)分別對所述的DSMZ：10017的菌株和ATCC：51573的菌株進行活化和富集，制備成相應的活化菌液；

(2)分別取一定量的活化菌液，離心去上清，并重懸于基礎培養基中，重復離心重懸步驟共三次，制備得到重懸菌液；

(3)在微生物燃料電池裝置的陽極室加入陽極運行培養基，在陰極室中加入陰極運行培養基，并分別調整為厭氧狀態；

(4)取一定量步驟(2)的重懸菌液接種于微生物燃料電池的陽極室中；

(5)將微生物燃料電池裝置置于37℃靜置培養，即得所述復合菌劑；

其中，所述步驟(1)中，所述ATCC：51573的菌株的活化和富集過程以乙酸鈉為電子供體，延胡索酸為電子受體；其活化培養基成分如下：1.64g/L乙酸鈉、0.6g/L KH₂PO₄、0.1g/LKCl、1.5g/L NH₄Cl、0.1g/L CaCl₂·2H2O、0.1g/L MgCl₂·6H₂O、40mM延胡索酸、1mL/L M液和10ml/L V液；其中，所述M液組成如下：0.1g/L CuCl₂·5H₂O、0.1g/L KAl(SO₄)₂、0.1g/LH₃BO₃、0.1g/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.1g/L Na₂WO₄·2H₂O、0.01g/L Na₂SeO₃、1.0g/L MnCl₂·H₂O、1.0g/L FeCl₂·7H₂O、1.0g/L CoCl₂·6H₂O、1.0g/L ZnCl₂·7H₂O和1.0g/L NiCl₂·6H₂O，pH為1；所述V液組成如下：2mg/L維生素B、10mg/L微生物B₆、5mg/L維生素B₂、2mg/L維生素H、5mg/L維生素B₁、5mg/L維生素B₃、5mg/L維生素B₅、0.1mg/L維生素B₁₂、5mg/L對氨基苯甲酸和5mg/L硫辛酸；

所述DSMZ：10017的菌株的活化和富集過程以丙酸鈉為電子供體和富馬酸二鈉為電子受體；其活化培養基成分如下：0.53g/LNa₂HPO₄·2H₂O、0.11g/L CaCl₂·2H₂O、0.41g/LKH₂PO₄、1mL/L微量元素SL-10、4.00g/L NaHCO₃、20mM富馬酸二鈉、10mM丙酸鈉、0.30g/LNH₄Cl、0.30g/L NaCl、0.10g/L MgCl₂·6H₂O、1mL/L亞曬酸-鎢酸鹽溶液、0.5mL/L的0.1％w/v的刃天青、10mL/L V液、0.35g/L Na2S·9H₂O；所述亞曬酸-鎢酸鹽溶液組成如下：0.5g/LNaOH、4mg/L Na₂WO₄·2H₂O、3mg/L Na₂SeO₃·5H₂O；

所述步驟(2)中，所述ATCC：51573的菌株和所述DSMZ：10017的菌株的活化菌液的體積比為1:1～2。