[發明專利]通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的培養基和方法

有效

• 申請號: 202010112599.3
• 申請日: 2020-02-24
• 公開（公告）號: CN111202004B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 張建;曹運梅;張欣然;趙振軍;熊玉婷;郭麗紅;李欣
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 江慧

1.一種通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的培養基，其特征在于，所述培養基包括誘導培養基、增殖培養基、成苗培養基；

所述誘導培養基為：MS + 0.5 mg/L～1.5 mg/L 2,4-D+ 0.5 mg/L～1.5 mg/L TDZ+500 mg/L 麥芽提取物+40 g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH 5.8；或為：WPM+0.5 mg/L～1.5 mg/LZT+0.5 mg/L～1.5 mg/L NAA+ 500 mg/L 麥芽提取物+40 g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH 5.8；

所述增殖培養基、成苗培養基均為：WPM+0.5 mg/L～1.5 mg/L 6-BA+7.0 g/L瓊脂+30g/L蔗糖，pH 5.8。

2.如權利要求1所述的培養基，其特征在于，所述誘導培養基為：MS +1 mg/L 2,4-D+1.5mg/L TDZ+ 500 mg/L 麥芽提取物+40 g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH 5.8；或為：WPM+1 mg/LZT+1 mg/L NAA+ 500 mg/L 麥芽提取物+40 g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH 5.8；

所述增殖培養基、成苗培養基均為：WPM+1 mg/L 6-BA+7.0 g/L瓊脂+30 g/L蔗糖，pH5.8。

3.一種通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的方法，其特征在于，所述方法包括：

步驟1、將三葉木通的果實經處理后切開，取出幼胚；

步驟2、將所得幼胚接種于誘導培養基中于光照條件下培養獲得胚狀體；

步驟3、將誘導出的胚狀體于增殖培養基中進行增殖繼代培養；

步驟4、轉移至成苗培養基上誘導成苗；

步驟5、將所得幼苗進行煉苗并移栽，獲得三葉木通再生苗；

所述誘導培養基、增殖培養基、成苗培養基為如權利要求1所述的培養基。

4.如權利要求3所述的通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的方法，其特征在于，所述步驟2中的光照條件為自然光，培養溫度為25±2℃。

5.如權利要求3所述的通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的方法，其特征在于，所述步驟2中誘導培養的時間為35～45天。

6.如權利要求3所述的通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的方法，其特征在于，所述步驟3中增殖繼代培養的時間為10～30天。

7.如權利要求3所述的通過胚狀體發生途徑誘導三葉木通植株再生的方法，其特征在于，所述步驟4中誘導成苗培養的時間為100～130天。